[發(fā)明專利]番茄潰瘍病菌有活力菌體的流式細(xì)胞術(shù)計(jì)數(shù)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410400015.7
• 申請(qǐng)日: 2014-08-14
• 公開（公告）號(hào): CN104181093A
• 公開（公告）日: 2014-12-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 羅來鑫;蔣娜;李健強(qiáng);許新;劉西莉;曹永松;阮小珀
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N15/14
• 分類號(hào): G01N15/14
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;陳曉慶

1.一種檢測(cè)待測(cè)樣品中有活力菌體的方法，包括如下步驟：將待測(cè)樣品進(jìn)行SYTO9染色，使用絕對(duì)計(jì)數(shù)管計(jì)數(shù)，得到待測(cè)樣品的總細(xì)胞數(shù)或總細(xì)胞濃度；將待測(cè)樣品進(jìn)行PI染色，使用絕對(duì)計(jì)數(shù)管計(jì)數(shù)，得到待測(cè)樣品的死細(xì)胞數(shù)或死細(xì)胞濃度；用待測(cè)樣品的總細(xì)胞數(shù)減去待測(cè)樣品的死細(xì)胞數(shù)得到待測(cè)樣品中有活力菌體的細(xì)胞數(shù)，或，用待測(cè)樣品的總細(xì)胞濃度減去待測(cè)樣品的死細(xì)胞濃度得到待測(cè)樣品中有活力菌體的濃度。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述絕對(duì)計(jì)數(shù)管計(jì)數(shù)是采用流式細(xì)胞儀結(jié)合絕對(duì)計(jì)數(shù)管進(jìn)行計(jì)數(shù)的。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述待測(cè)樣品中菌的濃度為10⁵-10⁷CFU/ml。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的方法，其特征在于：所述SYTO9染色時(shí)SYTO9在所述待測(cè)樣品中的濃度為50μmol/L；

所述SYTO9染色時(shí)染色時(shí)間為20-40min，具體為30min。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一所述的方法，其特征在于：所述PI染色時(shí)PI在所述待測(cè)樣品中的濃度為150μmol/L；

所述PI染色時(shí)染色時(shí)間為30-60min，具體為50-60min，再具體為60min。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一所述的方法，其特征在于：所述菌為番茄潰瘍病菌。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一所述的方法，其特征在于：所述待測(cè)樣品為番茄潰瘍病菌菌懸液。