[發明專利]番茄潰瘍病菌有活力菌體的流式細胞術計數方法

有效

• 申請號: 201410400015.7
• 申請日: 2014-08-14
• 公開（公告）號: CN104181093A
• 公開（公告）日: 2014-12-03
• 發明（設計）人: 羅來鑫;蔣娜;李健強;許新;劉西莉;曹永松;阮小珀
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: G01N15/14
• 分類號: G01N15/14
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;陳曉慶

1.一種檢測待測樣品中有活力菌體的方法，包括如下步驟：將待測樣品進行SYTO9染色，使用絕對計數管計數，得到待測樣品的總細胞數或總細胞濃度；將待測樣品進行PI染色，使用絕對計數管計數，得到待測樣品的死細胞數或死細胞濃度；用待測樣品的總細胞數減去待測樣品的死細胞數得到待測樣品中有活力菌體的細胞數，或，用待測樣品的總細胞濃度減去待測樣品的死細胞濃度得到待測樣品中有活力菌體的濃度。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述絕對計數管計數是采用流式細胞儀結合絕對計數管進行計數的。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述待測樣品中菌的濃度為10⁵-10⁷CFU/ml。

4.根據權利要求1-3任一所述的方法，其特征在于：所述SYTO9染色時SYTO9在所述待測樣品中的濃度為50μmol/L；

所述SYTO9染色時染色時間為20-40min，具體為30min。

5.根據權利要求1-4任一所述的方法，其特征在于：所述PI染色時PI在所述待測樣品中的濃度為150μmol/L；

所述PI染色時染色時間為30-60min，具體為50-60min，再具體為60min。

6.根據權利要求1-5任一所述的方法，其特征在于：所述菌為番茄潰瘍病菌。

7.根據權利要求1-6任一所述的方法，其特征在于：所述待測樣品為番茄潰瘍病菌菌懸液。