[發明專利]一種MEK激酶抑制劑

在審

• 申請號: 201410377809.6
• 申請日: 2014-08-01
• 公開（公告）號: CN105287509A
• 公開（公告）日: 2016-02-03
• 發明（設計）人: 陶建臣
• 申請（專利權）人: 陶建臣
• 主分類號: A61K31/37
• 分類號: A61K31/37;A61P35/00;C07D311/16
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種MEK激酶抑制劑，其特征在于，香豆素化合物G8935與MEK結合，用對接軟件將其與MEK進行對接，并將結合模式與二芳基胺類抑制劑PD318088，并將結合模式與二芳基胺類抑制劑PD318088進行了比較，發現兩者打分值相似，G8935與PD318088的重疊度非常高，而且C3位芐基占據新疏水口袋，是香豆素類的新結合點，在此基礎上設計了一系列3位、4位和7位為不同取代基的香豆素衍生物并進行了合成。

2.根據權利要求1所述的一種MEK激酶抑制劑，其特征在于，本發明采用以烷酰基乙酸乙酯為原料，與溴芐或對氟溴芐在堿性條件下應，制備3-芐基烷酰乙酸乙酯或3-取代芐基烷酰乙酸乙酯，然后與間苯二酚通過Pechmann應制備7-羥基香豆素中間體，最后與酰氯反應得到目標產物。

3.根據權利要求2所述的一種MEK激酶抑制劑，其特征在于，本發明采用HTRF的方法檢測了化合物與磷酸化MEK1的結合能力，采用384孔板，加入ActiveGST-MEK1，Eu-Anti-GST，Kinasetracer236和不同濃度的待測化合物，采用酶標儀檢測信號并對數據進行處理；所測99個化合物中，共發現25個化合物具有與磷酸化MEK1結合能力，IC50值最低達到54.57nM（M29）。

4.根據權利要求2所述的一種MEK激酶抑制劑，其特征在于，本發明同樣采用HTRF方法檢測化合物對磷酸化MEK1的抑制作用，加入化合物inactiveERK2，activeMEK1，ATP，然后加入抗體MAbAnti-phosphop44/42-K和MAbAntiGST-XL665，采用酶標儀檢測信號并對數據進行處理；實驗重復3次結果顯示化合物對磷酸化MEK1的抑制作用的IC50在10μM左右，因此化合物雖然與磷酸化的MEK1有較強的結合能力，但是并不能在底物ERK存在的環境中，影響到磷酸化MEK對ERK的磷酸化作用。

5.根據權利要求2所述的一種MEK激酶抑制劑，其特征在于，本發明同樣采用HTRF方法，檢測化合物對非磷酸化MEK1的抑制作用；加入化合物，activeBRAF，inactiveMEK1，ATP，然后加入抗體MAbAnti-phosphoMEK1/2-K和MAbAntiGST-XL665，采用酶標儀檢測信號并對數據進行處理；實驗重復3次結果顯示M2、M4、M5、M29、M56對非磷酸化MEK1的抑制作用較高，活性接近或高于陽性對照U0126。