[發(fā)明專利]一種通過基因阻斷提高鏈霉菌的土霉素產(chǎn)量的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410373431.2 | 申請日： | 2014-07-31 |
| 公開（公告）號： | CN105316383B | 公開（公告）日： | 2018-10-16 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 郭美錦;曹楠;儲炬;莊英萍;杭海峰 | 申請（專利權(quán)）人： | 華東理工大學(xué) |
| 主分類號： | C12P29/00 | 分類號： | C12P29/00;C12N1/21;C12R1/59 |
| 代理公司： | 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100 | 代理人： | 陳靜 |
| 地址： | 200237 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 通過 基因 阻斷 提高 霉菌 土霉素 產(chǎn)量 方法 | ||
1.一種生產(chǎn)土霉素的方法，其特征在于，所述方法包括：
(1)在土霉素生產(chǎn)菌株中，下調(diào)lsigB基因的表達；其中，所述的土霉素生產(chǎn)菌株是龜裂鏈霉菌；
(2)培養(yǎng)步驟(1)制備的菌株，從而生產(chǎn)土霉素。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，通過阻斷或敲除lsigB基因，從而下調(diào)土霉素生產(chǎn)菌株中l(wèi)sigB基因的表達。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在土霉素生產(chǎn)菌株中l(wèi)sigB基因位置插入外源基因，從而阻斷l(xiāng)sigB基因。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的土霉素生產(chǎn)菌株是龜裂鏈霉菌M4018。
5.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，步驟(2)的培養(yǎng)方法包括：
培養(yǎng)龜裂鏈霉菌孢子以形成菌絲細(xì)球，之后接種至發(fā)酵培養(yǎng)基中，30±2℃，220±50rpm發(fā)酵。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述的發(fā)酵培養(yǎng)基包括按照重量體積比：3％葡萄糖，1％蛋白胨，0.07％MOPS，0.02％氯化鈣，0.02％硝酸鈉，0.1％微量元素。
7.一種改良的土霉素生產(chǎn)菌株，所述的土霉素生產(chǎn)菌株是龜裂鏈霉菌，其特征在于，所述的菌株的基因組中l(wèi)sigB基因被阻斷或被敲除。
8.如權(quán)利要求7所述的菌株，其特征在于，以lsigB基因的部分序列片段作為同源臂，在土霉素生產(chǎn)菌株中l(wèi)sigB基因位置插入外源基因，從而獲得lsigB基因被阻斷或被敲除的菌株。
9.lsigB基因的用途，其特征在于，用于作為改良土霉素生產(chǎn)菌株、提高土霉素產(chǎn)量的靶點；其中，所述的土霉素生產(chǎn)菌株是龜裂鏈霉菌。
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