[發明專利]一種多樣品檢測農殘的分子印跡電致發光紙芯片的制備

有效

• 申請號: 201410371947.3
• 申請日: 2014-07-31
• 公開（公告）號: CN104132934B
• 公開（公告）日: 2016-10-12
• 發明（設計）人: 于京華;吳魯丹;顏梅;葛慎光;張彥;吳開慶;孫國強;李麗
• 申請（專利權）人: 濟南大學
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N27/26;G01N27/30
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技術領域

本發明涉及農藥殘留檢測技術領域，更具體地說是一種分子印跡電致發光同時多樣品檢測農藥殘留的紙芯片的制備，本發明還涉及采用所述的電致發光傳感芯片檢測水果、蔬菜中的農藥殘留物的方法。

背景技術

近年來，隨著生活質量的提高，食品安全問題越來越受到大家的重視。然而隨著農業技術的發展，農藥越來越多的被使用到水果蔬菜的生產中。食品中的農藥殘留對環境和人體健康構成的潛在威害逐漸受到大家的重視，食品中農藥殘留以造成人體急性或慢性中毒的案例報道也屢見不鮮，引起了人們的廣泛關注。

由于人們對食品中農藥殘留的關注度不曾衰減，各種檢測農藥殘留的方法也都應運而生。目前對農藥殘留的檢測方法較多，主要有化學法、色譜法、酶法、免疫法和微生物檢測法等。但這些檢測或篩選方法或多或少都存在一些缺點。

1.?化學法檢測農藥殘留是廣泛應用于農藥有機磷檢測的方法，但是該方法的缺點是在臨界點附近顏色變化不很明顯,主要針對幾種有機磷農藥敏感。易受一些還原性物質的干擾；

2.?色譜法主要包括氣相色譜法、高效液相色譜法和色譜儀—質譜聯用法。氣相色譜法，用于揮發性農藥的檢測是農藥殘留量檢測，高效液相色譜法用于不易氣化或受熱易分解的農藥的檢測。二者都是農藥殘留檢測的常用的方法，雖然靈敏度高，但存在樣品的前處理相對復雜、檢測周期長、程序復雜、所需試劑繁多等缺點。色譜儀—質譜聯用法法靈敏度比較高，但是儀器昂貴，操作比較復雜；

3.?酶試劑法雖然成本相對較低，但是檢測過程步驟較多，過程比較繁瑣，不利于迅速檢測；

4.?免疫法雖然特異性強、靈敏度高但同樣存在樣品的前處理相對復雜、檢測周期長、程序復雜、所需試劑繁多等缺點；

5.?微生物法具有成本低、省時等優點，但一般只用于篩選實驗；

以上幾種方法對于農藥殘留的檢測和分析都存在一些問題和缺點而限制其在實際樣品檢測中的應用。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供了一種具有樣品處理簡單、檢測速度快、成本低、靈敏度高、特異性強等特點的同時多組分檢測農藥殘留的分子印跡電致發光傳感紙芯片的制備及檢測方法。

為了解決上述技術問題，本發明是通過以下措施來實現的：一種多樣品檢測農藥殘留的分子印跡電致發光紙芯片的制備方法，其特征包括以下步驟：

（1）制備折疊式紙芯片：先用蠟打印機在A4紙上打印如附圖1的蠟圖案，并將帶有蠟圖案的A4紙放到平板加熱器或烘箱中，在60-150?℃下加熱0.5-2?min,?使蠟融化并浸透整個紙的厚度，形成疏水區域；采用絲網印刷電極的方法，在處理好的A4紙的未打印蠟的親水區域印刷碳工作電極和Ag/AgCl參比電極（如附圖2）；

（2）選擇能與不同的農藥殘留合成分子印跡聚合物（molecularly?imprinted?polymer，簡稱MIPs）的功能單體；

（3）按一定摩爾比將殘留農藥的模板分子、功能單體、交聯劑、致孔劑、引發劑混合均勻，制成MIPs溶膠；

（4）制備3D-石墨烯-納米金復合材料；

（5）制備g-C₃N₄量子點；

（6）利用層層自主裝表面修飾技術，將石墨烯-納米金復合材料和g-C₃N₄以及MIPs溶膠修飾在電極表面上，制作分子印跡電致發光傳感器。

?本發明所述的農藥殘留物模板分子、功能單體、交聯劑、致孔劑、引發劑的摩爾比為：0.1~1:1:0.5~3:35~60:0.05~0.25。

本發明所述的將石墨烯-納米金復合材料、g-C₃N₄和分子印跡聚合物（MIPs）修飾到印刷電極的表面包括以下步驟：

（1）將制備的紙芯片上的印刷電極用瑪瑙錘子仔細地打磨2?min；

（2）制備氧化石墨烯：

將2?g石墨烯加入到2?g硝酸鈉和40?mL?98%濃硫酸的冰水浴中，磁性攪拌20?min。在攪拌作用下，加入6?g高錳酸鉀，并于室溫環境下攪拌1?h。向上述溶液中加入180?mL超純水，于95?℃回流15?min。冷卻至室溫后用超純水稀釋，并加入30?mL?30%?的H₂O₂，此時溶液變為黃褐色。將得到的溶液抽濾，并用超純水洗滌至中性，將產品于60?℃真空烘箱中烘干；

（3）制備3D-石墨烯-納米金復合材料：