[發明專利]一種同時提取并分離煙草綠原酸、茄尼醇、生物堿、蕓香苷的方法

有效

• 申請號: 201410368309.6
• 申請日: 2014-07-30
• 公開（公告）號: CN104086425A
• 公開（公告）日: 2014-10-08
• 發明（設計）人: 杜詠梅;張懷寶;李曉芹;張忠鋒;侯小東;付秋娟;王愛華
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院煙草研究所
• 主分類號: C07C69/732
• 分類號: C07C69/732;C07C67/48;C07C33/02;C07C29/76;C07D401/04;C07H17/07;C07H1/08
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技術領域

本發明涉及一種煙草功能成分的綜合提取及分離技術，尤其涉及一種同時提取并分離煙草綠原酸、茄尼醇、煙堿、蕓香苷的方法。

背景技術

煙草的藥用價值在我國歷代本草和中醫藥文獻中均有論述，現代分析化學已經證明了煙草中富含多種生物活性功能成分。煙草是最豐富的植物茄尼醇（1-4%）資源；煙草葉片綠原酸（0.2-5.4%）含量與金銀花相當；煙草蕓香苷（蘆丁，最高達2%）含量與苦蕎主要功能成分相當；煙草中的煙堿及其相關的物質非常有希望作為將來治療阿爾茨海默氏病的候選藥物。煙堿農藥是一種傳統的高效低毒?“綠色農藥”。煙草中還含有蛋白質、氨基酸、蘋果酸、多糖等有益活性成分。我國煙草資源豐富，適應性廣，種植成本低，同時，卷煙行業大量的廢次煙葉也為煙草功能成分開發利用提供了豐富的原料來源。

目前，國內外對煙草茄尼醇、煙堿及蛋白質的提取、純化技術研究較多，尤其是茄尼醇、煙堿，其提取純化技術已得到廣泛開發和利用，煙草綠原酸的提取和利用也開始受到關注。但目前對于煙草功能成分的研究和利用主要以單一功能成分的提取利用技術為主，不同功能成分的綜合提取技術雖然開始受到關注，主要是茄尼醇和煙堿的綜合提取技術，煙草多種活性物質的綜合提取技術研究還報道較少，江南大學艾心靈等研究報道了以95%乙醇超聲波輔助同時提取煙草茄尼醇、綠原酸、生物堿的技術，提取率分別為82%、94%、95%，三種物質尤其是茄尼醇的提取效率較低，且試驗所需的提取溫度高達80℃，試驗能耗較高。

可見，當前的技術多是單項或某幾項提取，而且提取工藝不夠理想或提取率不高，目前有關煙草同時高效提取綠原酸、茄尼醇、煙堿、蕓香苷的綜合提取，并實現茄尼醇、綠原酸、蕓香苷、煙堿有效分離且操作簡單，節約溶劑，減少能耗的技術還未見報道。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術中存在的缺點，提供一種同時提取并分離煙草綠原酸、茄尼醇、煙堿、蕓香苷的方法。該方法將煙草四種功能物質同時高效提取出來，并實現煙草茄尼醇、綠原酸、蕓香苷、煙堿有效分離，不僅提高了煙草資源的利用率，而且操作簡單，節約溶劑，減少能耗。

為了實現上述目的，本發明所采用的技術方案是：一種同時提取并分離煙草綠原酸、茄尼醇、煙堿、蕓香苷的方法，其步驟包括：

步驟一、同時提取：將煙草原料粉碎后，設定提取溫度40～50℃，超聲頻率45?KHz，料液比10：1條件下，首先用80%乙醇提取一次，抽濾或離心后，殘渣再分別用80%、95%的乙醇各提取一次；三次提取液合并，獲得煙草綠原酸、茄尼醇、煙堿、蕓香苷的粗提液，煙草綠原酸、茄尼醇、煙堿、蕓香苷的提取率均達100%；

步驟二、分離：

分離茄尼醇：提取液減壓濃縮，沉淀，過濾后得茄尼醇沉淀物，茄尼醇沉淀物用乙醇溶解，氫氧化鈉皂化后，用石油醚或正己烷萃取，萃取液濃縮，獲得煙草茄尼醇粗品；

分離綠原酸、蕓香苷：向過濾掉茄尼醇沉淀物的提取液中加入1%的殼聚糖溶液絮凝除雜，過濾，調濾液pH值至2，室溫放置過夜，過濾得蕓香苷沉淀物，將蕓香苷沉淀物用熱水溶解、結晶，獲蕓香苷粗品；過濾蕓香苷沉淀物后的濾液通過大孔吸附樹脂，洗脫液洗脫，濃縮，獲綠原酸粗品；

或過濾掉茄尼醇沉淀物的提取液調pH至酸性，加入乙酸乙酯為萃取劑，萃取液合并，濃縮，獲得煙草綠原酸粗品；萃取綠原酸后的水相，室溫放置過夜，過濾得蕓香苷沉淀物，將蕓香苷沉淀物用熱水溶解、結晶，獲蕓香苷粗品；

分離煙堿：將分離茄尼醇、綠原酸、蕓香苷后的提取液，在堿性條件下，應用石油醚或正己烷萃取煙堿，再通過反萃取，獲得煙堿粗品。

進一步的，所述步驟一的提取時間為20min。

進一步的，所述步驟二中分離茄尼醇：將步驟一中獲得的提取液50℃減壓濃縮，至無醇味，回收乙醇，濃縮液冷卻后迅速過濾，過濾后得茄尼醇沉淀物；茄尼醇沉淀物以20-40%乙醇溶液洗滌后，用無水乙醇溶解，加入30%氫氧化鈉溶液,在40-50℃超聲條件下皂化40min，皂化完成后，加入去離子水，正己烷萃取3次，萃取液合并，濃縮，獲得茄尼醇粗品。

進一步的，所述步驟二中分離煙堿：將分離茄尼醇、綠原酸、蕓香苷后的提取液調pH值至13，用正己烷萃取5次，正己烷與水相的比例為1：1，再用20-30%硫酸水溶液進行反萃取，濃縮獲40%硫酸煙堿溶液。