[發(fā)明專利]一種小牛血去蛋白提取物組合物及其注射劑和制法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410367957.X
• 申請日: 2014-07-30
• 公開（公告）號: CN104147047A
• 公開（公告）日: 2014-11-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 姬彥峰
• 申請（專利權(quán)）人: 哈爾濱圣泰生物制藥有限公司
• 主分類號: A61K35/14
• 分類號: A61K35/14;A61K47/10;A61K47/36;A61K47/34;A61K9/19;A61K9/08;A61P9/10;A61P25/28
• 代理公司: 北京愛普納杰專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11419
• 代理人: 王玉松

1.一種小牛血去蛋白提取物的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括如下步驟：

a)將小牛血在30-40℃緩化20min，得緩化后的小牛血；

b)向步驟a)得到的緩化后的小牛血中加入鹽酸溶液進行酸沉，調(diào)整pH至3.5～4.0，得酸化后的小牛血；所述鹽酸溶液是純化水與質(zhì)量分?jǐn)?shù)為36％～38％的鹽酸按照1∶1的體積比配制的；

c)將步驟b)得到的酸化后的小牛血在-25℃下低溫冷凍24h，然后再以1℃/min的升溫速度升溫至60℃，并60℃恒溫1h，待冷凍后的小牛血融化后，在離心機轉(zhuǎn)速為15000轉(zhuǎn)/分鐘的情況下進行離心分離12min，收集上清液，備用；

d)向步驟c)得到的上清液中加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20％的NaOH溶液，調(diào)節(jié)pH值至8.0～8.5，得堿化后的上清液；

e)將步驟d)得到的堿化后的上清液在-20℃下低溫冷凍24h，然后再以1℃/min的升溫速度升溫至40℃，并40℃恒溫1h，待冷凍后的小牛血融化后，在離心機轉(zhuǎn)速為13000轉(zhuǎn)/分鐘的情況下進行離心分離，收集上清液，備用；

f)將步驟e)得到的上清液置于配液罐內(nèi)，在70r/min的攪拌速度下，按照上清液與乙醇溶液的體積比為1∶2的比例，緩慢加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80％的乙醇溶液，在離心機轉(zhuǎn)速為13000轉(zhuǎn)/分鐘的情況下進行離心分離，收集上清液，備用；

g)將步驟f)得到的上清液用截流分子量為5000道爾頓的超濾柱進行超濾，所得超濾液在真空度為-0.1MPa、60℃恒溫下進行真空濃縮，濃縮至體積為原超濾液體積的1/15，得濃縮超濾液；

h)將步驟g)得到的濃縮超濾液用截流分子量為5000道爾頓的超濾柱進行超濾，收集超濾后的液體，然后置于配液罐中在70r/min的攪拌速度下混合30min，即得小牛血去蛋白提取物。

2.由權(quán)利要求1所述的制備方法制得的小牛血去蛋白提取物制得的注射劑，其特征在于，所述注射劑包括粉針劑和水針劑。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的注射劑，其特征在于，所述注射劑為粉針劑，所述粉針劑包括下列重量份的原料：

小牛血去蛋白提取物??4000

凍干保護劑??????????200

注射用水????????????4000，

所述凍干保護劑是由海藻糖與PEG以3∶1的重量份數(shù)比組成。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的注射劑，其特征在于，所述注射劑為水針劑，所述水針劑包括下列重量份的原料：

小牛血去蛋白提取物??600

注射用水????????????400。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的注射劑的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括如下步驟：

a)準(zhǔn)備配液容器：用注射用水將配液容器沖洗干凈，備用；

b)濃配：稱取處方量的小牛血去蛋白提取物，按相對密度大于等于1.0560補加注射用水進行濃配，用截流分子量為5000道爾頓的中空纖維柱對小牛血去蛋白提取物進行預(yù)濾，然后再用截流分子量為5000道爾頓的膜片對小牛血去蛋白提取物進行超濾至稀配罐中，得濃配液，備用；

c)稀配：向步驟b)中含有濃配液的稀配罐中，按相對密度1.0260～1.0560補加注射用水進行稀配，得稀配液，備用；

d)向步驟c)得到的稀配液中添加10％的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至6.8～7.3，攪拌10min至均勻，取樣檢測，得澄明度合格的稀配液；

e)向步驟d)得到的澄明度合格的稀配液中，邊攪拌邊加入海藻糖與PEG，混合均勻，然后經(jīng)0.22μm筒式除菌過濾器過濾至緩沖罐，得除菌稀配液；

f)將步驟e)得到的除菌稀配液用波長為0.3的紫外線照射1min，得處理后的除菌稀配液；

g)灌裝：將清洗滅菌后的緩沖罐與硅膠管、陶瓷泵、灌裝針頭、分藥器、膠塞震蕩器用無菌操作法連接安裝到灌裝機上，對步驟f)得到的處理后的除菌稀配液進行灌裝，得灌裝稀配液；

h)凍干：將步驟g)得到的灌裝稀配液置于凍干機內(nèi)進行凍干，得注射劑，即粉針劑。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述步驟e)中，所述除菌過濾器上、下游壓力的壓差不超過0.08Mpa。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述步驟f)中，灌裝過程每30分鐘抽檢裝量一次，每個針頭抽檢2支，罐裝量為3.95～4.05ml/支。