[發明專利]可見分光光度法測定氨基甲酸乙酯含量的方法

在審

• 申請號: 201410365882.1
• 申請日: 2014-07-29
• 公開（公告）號: CN104142324A
• 公開（公告）日: 2014-11-12
• 發明（設計）人: 黃惠華;劉智鈞;周萌;張佳佳;王浩;黃秋婷
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/31
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 何淑珍

技術領域

本發明涉及一種快速檢測氨基甲酸乙酯含量的化學方法，具體涉及可見分光光度法測定氨基甲酸乙酯含量的方法。

背景技術

氨基甲酸乙酯（Ethyl?Carbamate，簡稱EC，又稱Urethane）是發酵酒在發酵及貯存過程中天然產生的污染物。氨基甲酸乙酯早在1943年就被證實為致癌物質。在1976年被發現在酒精飲料中含有氨基甲酸乙酯。研究表明，對嚙齒類動物，氨基甲酸乙酯是一種多位點致癌物，可導致肺癌、淋巴癌、肝癌和皮膚癌等疾病，并且乙醇（酒精）對其致癌性有促進作用。2007年，國際癌癥研究所（International?Agency?for?Research?on?Cancer，簡稱IARC）把氨基甲酸乙酯對人類的致癌毒性歸為2A類。目前氨基甲酸乙酯的污染，被認為是食品中繼黃曲霉毒素之后的又一重要問題。

其次，氨基甲酸乙酯是化工生產中的重要原料，具有廣泛的用途。可作農藥、醫藥等有機合成的中間體，也可用于合成異氰酸酯、無毒聚氰胺衍生物、聚乙酰胺，也可用以合成吡咯、三只會酮和三嗪等雜環化合物。

再次，氨基甲酸乙酯對延髓呼吸中樞的抑制作用較弱，為實驗動物比較安全的麻醉藥，麻醉可維持2~4?h，可用于動物的麻醉。一般，靜脈或腹腔注射用量：犬、貓、兔0.75~1?g/kg體重，配成30?%溶液用。肌內注射用量：豚鼠、大白鼠、小白鼠1~?1.5?g/kg體重，鳥類1.25?g/kg體重，配成20?%溶液用。

國內外都致力于簡便、快速、準確的氨基甲酸乙酯含量檢測方法研究，樣品前處理方法及檢測方法都在不斷改進。目前國內外對氨基甲酸乙酯的儀器分析檢測方法有氣相色譜法、氣相色譜-質譜法、液相色譜法、液相色譜-質譜法、薄層色譜法、傅立葉變換紅外光譜法等，其中最常用的是氣相色譜-質譜法。上述檢測方法準確度高，但存在儀器設備昂貴、前處理方法復雜、人員專業技術要求高、檢測成本高等缺點。因此，建立簡便、快捷、準確的檢測方法成為了氨基甲酸乙酯檢測迫切需要解決的重要內容。

本發明提供可見分光光度法測定氨基甲酸乙酯含量的方法。該法以二乙酰一肟在加熱與酸性條件下，生成二乙酰，然后再與氨基甲酸乙酯在H⁺、Fe³⁺與氨基硫脲的參與下顯色，其濃度與吸光值測量吸光值在一定范圍內符合朗伯—比爾定律，從而可用分光光度法進行分析。

發明內容

本發明提供可見分光光度法測定氨基甲酸乙酯含量的方法。該法以二乙酰一肟在加熱與酸性條件下，生成二乙酰，然后再與氨基甲酸乙酯在H⁺、Fe³⁺與氨基硫脲的參與下顯色，其濃度與吸光值測量吸光值在一定范圍內呈正相關，即氨基甲酸乙酯濃度越大吸光度越大。根據吸光度的大小和標準曲線即可計算氨基甲酸乙酯的濃度。

本發明提供可見分光光度法測定氨基甲酸乙酯含量的方法，具體步驟為：

（1）標準工作曲線的制備：

（1.1）分別于12支試管內加入濃度為0?mg/L、10?mg/L、20?mg/L、40?mg/L、60?mg/L、80?mg/L、100?mg/L、200?mg/L、400?mg/L、600?mg/L、800?mg/L、1000?mg/L的氨基甲酸乙酯標準溶液1~5?mL；

（1.2）再加入0.3~2.0?mL混合酸，加入0.1~1.5?mL氯化鐵水溶液，再加入0.1~1.0?mL乙二酰一肟水溶液，0.02~0.20?mL氨基硫脲水溶液；

（1.3）定容后充分混合，于100?℃沸水浴中加熱5~20?min，冷卻5?min，用可見分光光度計在波長500~550?nm處用1?cm比色皿比色，記錄吸光度A₀、A₁、A₂、A₃、A₄、A₅、A₆、A₇、A₈、A₉、A₁₀、A₁₁；

（1.4）以氨基甲酸乙酯標準溶液濃度為橫坐標，對應的吸光度為縱坐標作圖，即得氨基甲酸乙酯標準工作曲線；

（2）氨基甲酸乙酯的含量的測定：

（2.1）對于氨基甲酸乙酯含量低于100?mg/L的液體樣品，于圓底燒瓶中加入含氨基甲酸乙酯的樣品溶液10.0~50.0?mL，于旋轉蒸發器中60~80?℃減壓濃縮至0.5~1?mL，并轉移至刻度試管中，得到待測試樣；