[發明專利]一種抗術后疤痕的可降解多支化糖肽水凝膠及其制備方法

有效

• 申請號: 201410365194.5
• 申請日: 2014-07-29
• 公開（公告）號: CN104311641B
• 公開（公告）日: 2017-05-24
• 發明（設計）人: 張先正;陳巍海;曾旋;馮俊
• 申請（專利權）人: 武漢拜爾默生物科技有限公司
• 主分類號: C07K9/00
• 分類號: C07K9/00;C07K1/107;A61K38/14;A61K9/06;A61P27/06
• 代理公司: 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙)42222
• 代理人: 汪俊鋒

1.一種抗術后疤痕的多支化糖肽水凝膠的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）利用固相合成方法制備含有膽固醇作為疏水端的三肽或四肽，三肽的氨基酸序列為天冬氨酸-天冬氨酸-苯丙氨酸、苯丙氨酸-天冬氨酸-苯丙氨酸或苯丙氨酸-苯丙氨酸-天冬氨酸，四肽的氨基酸序列為苯丙氨酸-苯丙氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸；

（2）通過使用不同的切落劑將合成的三肽或四肽從固相切落，得到含有一個、兩個或三個羧基的三肽或四肽；

（3）純化的三肽或四肽與氨基葡萄糖進行縮合反應得到多支化糖肽；

（4）通過高效液相色譜法分離純化所制得的多支化多肽；

（5）將多支化糖肽分散在磷酸鹽緩沖溶液中，通過加熱溶解-冷卻法制備得到多支化糖肽水凝膠。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，固相合成技術所采用的樹脂為2-氯-三苯甲基氯樹脂、Rink Amide樹脂或MBHA樹脂中的一種，肽鏈的延長為碳端到氮端。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟（2）中，所用切落劑是體積比為1：2：7的醋酸、三氟乙醇和二氯甲烷時，天冬氨酸的側基保護基OtBu不會被切除，切下的肽鏈只含有碳端一個羧基；當所用切落劑是體積比為5：5的三氟乙酸和二氯甲烷的混合溶液時，天冬氨酸的側基保護基OtBu被切除，切下的肽鏈中的羧基包括碳端的羧基和側鏈的羧基，肽鏈含有一個天冬氨酸就有兩個羧基，肽鏈含有兩個天冬氨酸就有三個羧基。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟（4）中高效液相色譜法分離純化多支化多肽的條件是：HPLC分離柱為C₁₈柱，用含0.1% （v/v）NH₄OH的乙腈和含0.1% （v/v）NH₄OH的去離子水做梯度淋洗，紫外檢測波長為254 nm。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟（3）中合成多支化糖肽的縮合劑是N,N-二環己基碳二亞胺或N-羥基琥珀酰亞胺中的一種。

6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟（5）中磷酸緩沖溶液的濃度為10 mM，pH為7.4。

7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟（5）中，通過加熱溶解-冷卻法制備糖肽水凝膠時，先把多支化糖肽加熱到60-80℃使糖肽完全溶解，隨后靜置冷卻到室溫形成水凝膠。

8.權利要求1~7中任一種方法所制備的多支化糖肽水凝膠。

9.權利要求8所述的多支化糖肽水凝膠在制備術后疤痕抑制劑上的應用。