[發明專利]一種利用大白菜球葉獲得再生植株的培養方法

有效

• 申請號: 201410364506.0
• 申請日: 2014-07-29
• 公開（公告）號: CN104115751A
• 公開（公告）日: 2014-10-29
• 發明（設計）人: 劉倩倩;劉維信
• 申請（專利權）人: 青島農業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種利用大白菜球葉獲得再生植株的培養方法，其特征在于包括下列步驟：

(1)選取結球期大白菜外部球葉，去掉葉柄，在無菌條件下，先用體積分數70％的酒精表面消毒30s，無菌水漂洗一遍，再倒入質量分數5％的NaClO溶液滅菌10min，無菌水輕輕漂洗15min，期間換水5-6次，消毒完畢，然后用滅菌吸水紙將葉片殘留水分吸干；

(2)將滅菌后的葉片切分為邊長1.5-2.0cm的葉塊，避開較粗葉脈，葉正面向上平置于芽誘導培養基上。在光照強度1500-2000Lux，光周期16h/d，溫度24±1℃條件下進行培養；

(3)外植體在芽誘導培養基中培養28d，之后轉入MS基本培養基中繼續培養，將外植體上長度大于1.5cm的再生不定芽切下，轉入生根培養基誘導生根，以上培養條件均為：光照強度1500-2000Lux，光周期16h/d，溫度24±1℃；

(4)再生芽基部形成大量毛根后，打開培養瓶蓋煉苗4-5d，將再生苗根部的生根培養基洗凈，栽入盛有固體基質的塑料花盆中，基質采用蛭石和草炭體積比1∶1混合而成，盆口用保鮮薄膜覆蓋保濕，3d后，在薄膜表面打少量小孔，后期打孔數逐漸增加，孔隙逐漸加大，覆膜培養10d后，揭去保鮮薄膜，將再生植株置于室溫下培養，基質栽培過程中，均給予自然光照。

2.如權利要求1所述的利用大白菜球葉獲得再生植株的培養方法，其特征在于所述步驟(2)中的芽誘導培養基由MS、6-BA、NAA、AgNO₃、蔗糖和瓊脂組成，其中每升MS中加入6-BA4mg、NAA1mg、AgNO₃4mg、蔗糖30g、瓊脂0.7mg，pH為5.8。

3.如權利要求1所述的利用大白菜球葉獲得再生植株的培養方法，其特征在于所述步驟(3)中的MS基本培養基為不添加激素的常規MS培養基。

4.如權利要求1所述的利用大白菜球葉獲得再生植株的培養方法，其特征在于所述步驟(3)中的生根培養基由MS、NAA、蔗糖和瓊脂組成，其中，每升MS中加入NAA0.5mg、蔗糖30g以及瓊脂0.7mg，pH為5.8。