[發明專利]條件型伊維菌素受體IVMR轉基因小鼠模型的構建方法及應用有效
| 申請號： | 201410363847.6 | 申請日： | 2014-07-28 |
| 公開（公告）號： | CN104131036B | 公開（公告）日： | 2017-02-22 |
| 發明（設計）人： | 丁玉強;胡玲;張玲;黃纓;張磊;宋寧寧 | 申請（專利權）人： | 同濟大學 |
| 主分類號： | C12N15/89 | 分類號： | C12N15/89;A01K67/027;A61K49/00 |
| 代理公司： | 上海科盛知識產權代理有限公司31225 | 代理人： | 葉敏華 |
| 地址： | 200092 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 條件 型伊維 菌素 受體 ivmr 轉基因 小鼠 模型 構建 方法 應用 | ||
1.一種條件型伊維菌素受體IVMR轉基因小鼠模型的構建方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)將IVMR-2A-GFP的序列插入到Rosa26基因位點的下游，緊接在一個loxP位點包圍的STOP元件后面，構建Rosa26-IVMR打靶載體；
(2)將Rosa26-IVMR打靶載體電轉進小鼠胚胎干細胞中進行同源重組，經過正負篩選和PCR篩選完成同源重組的胚胎干細胞；
(3)將陽性的胚胎干細胞移植進母鼠的囊胚中，選取出生的嵌合小鼠與野生型小鼠進行交配，鑒定為陽性的子代小鼠即為IVMR轉基因小鼠；
(4)將表達Cre重組酶的病毒經立體定位注射進IVMR轉基因小鼠的腦中，或者將特定神經元表達Cre重組酶的小鼠與IVMR轉基因小鼠進行交配，得到的雙陽性的子代小鼠，成功構建條件型IVMR轉基因小鼠。
2.根據權利要求1所述的一種條件型伊維菌素受體IVMR轉基因小鼠模型的構建方法，其特征在于，步驟(1)～步驟(4)中分別進一步包括對所獲得的小鼠利用特異基因擴增引物進行基因型鑒定。
3.一種采用權利要求1方法得到的條件型伊維菌素受體IVMR轉基因小鼠模型。
4.一種采用權利要求1方法得到的條件型伊維菌素受體IVMR轉基因小鼠模型在研究腦神經元活性下降與神經元功能和動物行為中的應用。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，對注射病毒或者特定神經元表達Cre重組酶的IVMR轉基因小鼠給藥伊維菌素IVM，降低特定神經元的活性。
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