[發(fā)明專利]一種食用香精香料中七種成分同時(shí)測(cè)定的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410362880.7
• 申請(qǐng)日: 2014-07-28
• 公開（公告）號(hào): CN104297359A
• 公開（公告）日: 2015-01-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王素娟;繆明明;秦云華;張承明;夏建軍;王嵐;蔣次清;陳進(jìn)雄;羅林
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 云南中煙工業(yè)有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 昆明正原專利商標(biāo)代理有限公司 53100
• 代理人: 金耀生

1.一種食用香精香料中七種成分同時(shí)測(cè)定的方法，其特征在于包括以下步驟：

A、萃取溶液的配制：取甲醇制備成體積比7:3的甲醇-水溶液即為萃取溶液；

B、標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：用含內(nèi)標(biāo)的萃取溶液分別配制水楊酸、環(huán)己基氨基磺酸鈉、苯甲酸、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯、丁酯的標(biāo)準(zhǔn)溶液；

C、樣品溶液的制備：使用含內(nèi)標(biāo)的萃取溶液萃取食用香精香料樣品，過有機(jī)相濾膜后得到樣品溶液；

D、超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀分析：利用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀分別對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液進(jìn)行檢測(cè)分析；

E、食用香精香料中七種成分水楊酸、環(huán)己基氨基磺酸鈉、苯甲酸、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯、丁酯含量的計(jì)算。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述食用香精香料中七種成分同時(shí)測(cè)定的方法，其特征在于B步驟中所述標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制是：分別稱取水楊酸、環(huán)己基氨基磺酸鈉、苯甲酸、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯、丁酯各20mg，用甲醇溶解后轉(zhuǎn)移至100mL棕色容量瓶中，定容至刻度，分別得到單一標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液；稱取水楊酸-d4?10mg，用甲醇溶解后轉(zhuǎn)移至50mL棕色容量瓶中，甲醇定容至刻度，得到內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液；分別取單一標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.5~2mL至50mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，得到一級(jí)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液；取內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液1mL至50mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，得到一級(jí)內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液；分別準(zhǔn)確移取0.1mL、0.5mL、1mL、2mL、5mL的一級(jí)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液至50mL棕色容量瓶中，每個(gè)棕色容量瓶均加入1mL一級(jí)內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液，用萃取溶液定容至刻度，得到系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述食用香精香料中七種成分同時(shí)測(cè)定的方法，其特征在于取0.4mL內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液至1L棕色容量瓶中，用萃取溶液定容至刻度，得到含內(nèi)標(biāo)的萃取溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述食用香精香料中七種成分同時(shí)測(cè)定的方法，其特征在于所述含內(nèi)標(biāo)的萃取溶液中的內(nèi)標(biāo)物為水楊酸-d4。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述食用香精香料中七種成分同時(shí)測(cè)定的方法，其特征在于C步驟中所述樣品溶液的制備方法是：稱取0.5g試樣于50mL具塞錐形瓶中，準(zhǔn)確加入25mL含內(nèi)標(biāo)的萃取溶液，用150r/min振蕩萃取20min，取上清液過有機(jī)相濾膜，濾液為樣品溶液。

6.根據(jù)權(quán)利要求1或5所述食用香精香料中七種成分同時(shí)測(cè)定的方法，其特征在于所述的有機(jī)相濾膜為0.22μm聚醚砜濾膜。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述食用香精香料中七種成分同時(shí)測(cè)定的方法，其特征在于D步驟中所述的液相色譜分析條件為：色譜柱采用C18，1.7μm，2.1×100mm色譜柱；流動(dòng)相為甲醇A和0.05%甲酸水溶液B；流速：0.4mL/min；進(jìn)樣量：5μL；柱溫：40℃；樣品溫度：10℃；采用梯度洗脫程序，即初始A是10%，B是90%，1min時(shí)A是35%，B是65%，4min時(shí)A是65%，B是35%，6min時(shí)初始A是90%，B是10%，7min時(shí)A是90%，B是10%，8min時(shí)A是10%，B是90%，10min時(shí)A是10%，B是90%；所述的質(zhì)譜條件為采用電噴霧離子源（ESI）負(fù)離子模式，掃描方式為多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式，電噴霧電壓為-4500V，離子源溫度600℃，氣簾氣：25Psi，霧化氣：55Psi，輔助加熱氣：50Psi，水楊酸、環(huán)己基氨基磺酸鈉、苯甲酸、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯、丁酯和水楊酸-d4的定量離子對(duì)分別為：m/z?92.9、79.9、77.0、92.0、91.9、92.0、92.1、96.9。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述食用香精香料中七種成分同時(shí)測(cè)定的方法，其特征在于E步驟中所述含量的計(jì)算是：首先以標(biāo)準(zhǔn)溶液所檢測(cè)出的目標(biāo)物和內(nèi)標(biāo)物的色譜峰面積比對(duì)應(yīng)其相應(yīng)濃度比進(jìn)行回歸分析得到標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程，然后將樣品溶液檢出的目標(biāo)物的色譜峰面積，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程，即得到樣品中水楊酸、環(huán)己基氨基磺酸鈉、苯甲酸、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯、丁酯的含量。