[發明專利]從聚硒植物碎米薺中提取硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸的方法

有效

• 申請號: 201410361185.9
• 申請日: 2014-07-25
• 公開（公告）號: CN104086471A
• 公開（公告）日: 2014-10-08
• 發明（設計）人: 陳永波;胡百順;李紅英;黃光昱;石月明
• 申請（專利權）人: 恩施土家族苗族自治州農業科學院
• 主分類號: C07C391/00
• 分類號: C07C391/00;A23L1/305;A61K31/198;A61P3/02
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技術領域

本發明涉及從聚硒植物碎米薺中提取硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸的方法。

背景技術

硒是人體必需的微量元素之一，硒代胱氨酸是人體必需的第二十一種氨基酸，硒代蛋氨酸取代蛋氨酸在人體中合成蛋白質，人類40多種疾病與缺硒有關，然而由于硒屬于稀散元素，在地球上得含量很少，致使全球約有72％的地區缺硒，在中國也有9億多人需要補硒，每年硒的需求量約為1000噸，其中80％依賴進口，以前人和動物補硒最主要的方法是在食品中和飼料中添加亞硒酸鈉，或給病人吃富硒酵母片，但亞硒酸鈉對人體的危害也已為人們公認，發達國家早已不允許在飼料中添加亞硒酸鈉，我國也規定了從2013年1月開始不允許再在食鹽中添加亞硒酸鈉，對硒的需求量又增加了200噸硒的缺口。

碎米薺是十字花科碎米薺屬植物，因聚硒能力超強而引起科研工作者和企業的廣泛關注，據報道，該植物含硒量最高可達8000mg/kg，且90％以上以硒代半胱氨酸形態存在。經恩施州硒研究院研究發現，碎米薺中不僅含有較高的硒代胱氨酸，也有一定量的硒代蛋氨酸，是一種利用價值很高的生物硒資源，雖然能夠直接食用，但由于還沒有通過食品認證，不能添加到食品中，造成資源巨大的浪費。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種從聚硒植物碎米薺中提取硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸的方法。

本發明采用如下技術方案，一種從聚硒植物碎米薺中提取硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸的方法，其特征在于具體步驟如下：

a.碎米薺原料預處理：將聚硒碎米薺植株曬干、粉碎，過40目篩；

b.硒代胱氨酸的提取和分離：粉碎的碎米薺用水或0.1-6mol/L的鹽酸或0.1-6mol/L的NaOH溶液，在60℃-120℃下超聲提取或震蕩60min-180min提取，過濾，將殘渣重復提取2次，合并濾液，將溶液pH值調節到6-8；

c.硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸分離條件的確定：以DL-硒代胱氨酸和DL-硒代蛋氨酸為對照品，用高效液相色譜-原子熒光聯用法HPLC-HG-AFS確定分離條件為陰離子交換柱或C₁₈制備色譜柱，流動相為30mM-100mM的磷酸二氫氨水溶液pH值4-10，采用梯度洗脫，流速0.1-1.0mL/min，硒代胱氨酸保留時間為2.42±0.25min，硒代蛋氨酸保留時間為3.40±0.34min；

d.分離：水解液進樣到25-45μm陰離子交換柱或C₁₈制備色譜柱分離，用30mM-100mM的磷酸二氫氨水溶液pH值4-10為洗脫液，采用中試高壓制備系統，按峰收集硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸對應洗脫液，合并洗脫液；

e.透析：將洗脫液裝入截留分子量100-500的纖維素酯透析袋，放入超純水中，透去無機鹽離子，透析袋內為硒代胱氨酸或硒代蛋氨酸溶液；

f.冷凍干燥：將上步驟所得冷凍干燥，得硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸精品；

e.產品純度檢測：以DL-硒代胱氨酸和DL-硒代蛋氨酸為對照品，用高效液相色譜-原子熒光聯用法或高效液相-電感耦合等離子質譜法測定。

本發明一種從聚硒植物碎米薺中提取硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸的方法，其特征在于步驟a中所述的原料聚硒碎米薺植株為其根、莖、葉。

本發明一種從聚硒植物碎米薺中提取硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸的方法，其特征在于步驟f中所述的冷凍干燥為：先將透析得到的硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸溶液在冰箱冷凍室或冷凍干燥機的冷凍室內-20℃下冷凍成冰狀，取出，放在真空干燥箱的干燥架的物料盤中，蓋好有機玻璃罩，打開冷凍干燥箱的真空泵和冷阱，在-56℃、10Pa以下干燥24h以上，再將透析袋內粉末刮下，得硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸精品。

本發明采用化學方法，將天然碎米薺中硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸分離提取出來，作為生物硒添加到藥品、注射液和食品、保健品中，可實現人類科學補硒；通過培植聚硒碎米薺原料——生產硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸原料藥——生產硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸注射液、食品及保健品添加劑產業鏈，解決缺硒地區補硒的問題，為人類健康作貢獻。

本發明的技術方案是：從碎米薺中提取硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸，包括以下步驟：

a碎米薺原料預處理：將聚硒碎米薺植株(包括根、莖、葉)曬干、粉碎；

b硒代胱氨酸的提取和分離：粉碎的碎米薺用水或0.1-6mol/L的鹽酸或0.1-6mol/L的NaOH溶液，60℃-120℃超聲提取或震蕩60min-240min提取，過濾，將殘渣反復提取2次，合并濾液，將溶液pH值調節到5-9；