[發明專利]林蛙提取混合液及其在治療及預防腳氣的藥物中的用途

在審

• 申請號: 201410360106.2
• 申請日: 2014-07-25
• 公開（公告）號: CN104173382A
• 公開（公告）日: 2014-12-03
• 發明（設計）人: 滕樂生;李佺;謝晶;劉艷;逯家輝;孟慶繁;張杰;劉瑜;劉博通;滕利榮
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: A61K35/56
• 分類號: A61K35/56;A61K9/06;A61K9/12;A61K9/08;A61P17/00;A61P31/10;A47K10/16
• 代理公司: 長春吉大專利代理有限責任公司 22201
• 代理人: 張景林;王恩遠

1.一種林蛙提取混合液，其由如下步驟制備得到：

(1)將10～45重量份林蛙干除雜除塵后分別經20～100目粉碎，使林蛙干粉碎物的粒徑在500μm以下，按照1g：1～10mL的比例加入復合酶水解液，復合酶水解液中含木瓜蛋白酶1～5wt％、胰蛋白酶2～4wt％，風味蛋白酶1～3wt％，酶解溫度為50～55℃，酶解時間為1～2h，酶解pH為7.0～7.5，而后85～90℃下滅酶5～15min，將混合物在溫度10～30℃時離心，離心時間為1～5min，離心轉速為2000～4000rpm，取離心后混合液體積20～40％的上層上清液；

(2)將取上清后剩余混合物放入膠體磨，研磨2～15min，使混合物的平均粒徑在300μm以下；將混合物放入高剪切分散乳化機內，剪切1～15min，使混合物平均粒徑在100～200μm之間，將混合物進行噴霧干燥成粉末狀，此時得到剩余混合物的超微粉；

將上述超微粉加入到質量濃度為2～10％醋酸中，醋酸與超微粉的體積質量比為10～40mL：1g；超聲5～75min，超聲溫度為4～30℃；經150μm紗網過濾，150μm紗網上面未過濾物質加入質量體積比為1g：1～8mL的0.01～0.03mol/L氫氧化鈉，進行微波提取，微波功率為500～600W，微波時間3～9min，再次經150μm紗網過濾；合并兩次濾液，30～50℃下攪拌10～30min，攪拌速度為100～200rpm；攪拌后的濾液離心，離心溫度為4～30℃，離心時間為2～40min，離心轉速為2000～15000rpm；取上清，減壓濃縮，壓力為600～700托，溫度為65～70℃，濃縮體積比為8～40：1；

(3)將步驟(1)和步驟(2)得到的產物混合，即得到林蛙提取混合液。

2.權利要求1所述的林蛙提取混合液在制備治療及預防腳氣的藥物中的用途。

3.一種治療及預防腳氣的林蛙提取混合液軟膏劑，其由如下步驟制備得到：

(1)油相的制備：取5～15重量份石蠟、2～10重量份單硬脂酸甘油脂、10～20重量份白凡士林、5～30重量份液體石蠟、1～15重量份司盤40、2～10重量份乳化劑OP、1～8重量份對羥基苯甲酸乙酯，混合后研磨混勻，得到油相；

(2)林蛙提取混合液軟膏劑的制備：將步驟(1)制得的油相與權利要求1所述的由10～45重量份林蛙干制得的林蛙提取混合液分別加熱至70～100℃，將林蛙提取混合液加入到所述油相中，邊加入邊攪拌，攪拌時間為10～15min，攪拌速度為100～300rpm，再經納米勻質機勻質4～7次，115～121℃滅菌10～30min；然后將1～5重量份冰片加熱到70～100℃過0.45μm膜，無菌條件下與上述滅菌后產物混合均勻，即得到用于治療及預防腳氣的林蛙提取混合液軟膏劑。

4.一種治療及預防腳氣的林蛙提取混合液噴霧劑，其由如下方法制備得到：向權利要求1所述的由10～45重量份林蛙干制得的林蛙提取混合液中加入2～4重量份的PEG4₄₀₀、1～5重量份的氯化鈉、1～2重量份的苯扎溴銨，100～200rpm下攪拌10～25min，加水至1000重量份，150～200rpm下攪拌10～30min，使上述物質充分混勻，115～121℃下滅菌10～20min；自體冷卻至室溫后分裝入氣霧劑瓶，即得到治療及預防腳氣的林蛙提取混合液噴霧劑。

5.一種治療及預防腳氣的林蛙提取混合液濕巾，其由如下方法制備得到：向權利要求1所述的由10～45重量份林蛙干制得的林蛙提取混合液中加入2～4重量份的PEG4₄₀₀、1～5重量份的氯化鈉、1～2重量份的苯扎溴銨，100～200rpm下攪拌10～25min，加水至1000重量份，150～200rpm下攪拌10～30min，使上述物質充分混勻，115～121℃下滅菌10～20min；自體冷卻至室溫后每50～60mL加入到放有(15～20)cm×(15～20)cm無菌無紡布的獨立包裝袋內，密封即得到治療及預防腳氣的林蛙提取混合液濕巾。

6.一種治療及預防腳氣的林蛙提取混合液口服劑，其由如下步驟制備得到：

(1)減壓濃縮：將權利要求1所述的由10～45重量份林蛙干制得的林蛙提取混合液在減壓條件下進行蒸餾，壓力在8×10³～3×10⁴帕，溫度為50～85℃，濃縮比為1～5:1，得濃縮液；

(2)將研細的1～5重量份醋酸鋅緩慢加入到濃縮液中，邊加入邊攪拌，攪拌速度為100～300rpm，攪拌時間為10～15min；加完后用NaOH調節pH為6.2～6.5，攪勻后使其自然沉降，4℃冷卻過夜；

(3)將上述產物0.45μm濾膜過濾，得澄清液體后，加入5～15重量份檸檬酸、5～25重量份蜂蜜、5～30重量份白砂糖，加熱至40～75℃，100～300rpm攪拌，攪拌時間10～30min，混合均勻，趁熱再次0.45μm濾膜過濾，再向清液中加入5～15重量份黃原膠和5～15重量份山梨酸鉀，最后經0.22μm濾膜精濾；

(4)灌裝壓蓋：在無菌條件下灌裝，壓蓋封口；

(5)滅菌：加熱到62～65℃，保持30～50min，自體冷卻至室溫即得到治療及預防腳氣的林蛙提取混合液口服劑。