[發明專利]一種基于核酸適配體探針熒光傳感分析檢測待測樣本中的靶標物質的方法有效
| 申請號: | 201410360025.2 | 申請日: | 2014-07-25 |
| 公開(公告)號: | CN104178568A | 公開(公告)日: | 2014-12-03 |
| 發明(設計)人: | 周小紅;向宇;王若瑜;施漢昌 | 申請(專利權)人: | 清華大學 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人: | 關暢 |
| 地址: | 100084 北京市海淀區北京*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 基于 核酸 適配體 探針 熒光 傳感 分析 檢測 樣本 中的 靶標 物質 方法 | ||
1.一種檢測待測樣本中是否含有靶標物質的方法,包括如下步驟:
(1)將功能磁珠與所述待測樣本共孵育;所述功能磁珠是將(a)和(b)雜交得到的;所述(a)為表面修飾有特異識別靶標物質的核酸適配體的磁珠;所述(b)為連接有鏈霉親和素和標記物的探針;所述探針為與所述核酸適配體部分互補的單鏈核酸分子;
(2)完成步驟(1)后,進行磁分離,收集上清液;
(3)在與標記物相應的的激發波長激發下,采用表面修飾有脫硫生物素或生物素的固相芯片檢測步驟(2)得到的上清液,根據信號值判斷待測樣本中是否含有靶標物質。
2.如權利要求1所述的方法,其特征在于:所述表面修飾有脫硫生物素的固相芯片的制備方法包括如下步驟:
(1)取固相芯片,使其表面羥基化;
(2)完成步驟(1)后,取固相芯片,使其表面修飾APTS;
(3)完成步驟(2)后,取固相芯片,使其表面修飾脫硫生物素。
3.如權利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述固相芯片為光纖。
4.如權利要求1至3中任一所述的方法,其特征在于:所述靶標物質為赭曲霉素A。
5.如權利要求1至4中任一所述的方法,其特征在于:所述磁珠為羧基磁珠。
6.如權利要求1至5中任一所述的方法,其特征在于:所述核酸適配體如序列表的序列1所示,所述探針如序列表的序列2所示。
7.一種檢測待測樣本中是否含有靶標物質的試劑盒,包括功能磁珠和表面修飾有脫硫生物素或生物素的固相芯片;所述功能磁珠是將(a)和(b)雜交得到的;所述(a)為表面修飾有特異識別靶標物質的核酸適配體的磁珠;所述(b)為連接有鏈霉親和素和標記物的探針;所述探針為與所述核酸適配體部分互補的單鏈核酸分子。
8.一種檢測待測樣本中是否含有靶標物質的試劑盒,包括“表面修飾有脫硫生物素或生物素的固相芯片”、“表面修飾有特異識別靶標物質的核酸適配體的磁珠”和“連接有鏈霉親和素和標記物的探針”;所述探針為與所述核酸適配體部分互補的單鏈核酸分子。
9.如權利要求7或8所述的試劑盒,其特征在于:所述固相芯片為光纖;所述磁珠為羧基磁珠。
10.如權利要求7至9中任一所述的方法,其特征在于:所述靶標物質為赭曲霉素A;所述核酸適配體如序列表的序列1所示,所述探針如序列表的序列2所示。
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