[發(fā)明專利]一種炔諾酮衍生物及其中間體的雜質(zhì)檢測(cè)分析方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410358984.0
• 申請(qǐng)日: 2014-07-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105277633B
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-06-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王詠;蘆飛;李文君
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江仙琚制藥股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
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技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種甾體化合物的雜質(zhì)分析方法，特別是涉及一種炔諾酮衍生物及其中間體的雜質(zhì)檢測(cè)分析方法。

背景技術(shù)

炔諾酮類藥物為一類孕激素，可以用來(lái)治療經(jīng)前綜合癥、痛經(jīng)、經(jīng)期出血量過(guò)多、經(jīng)期不正常、更年期綜合癥，也常用來(lái)作為口服短效避孕藥。炔諾酮是首個(gè)可以合成的口服高效孕激素，其酯化衍生物具有同樣的藥理作用，而且延長(zhǎng)了作用的時(shí)間。常見(jiàn)的炔諾酮酯化衍生物有醋酸炔諾酮、己酸炔諾酮、庚酸炔諾酮，辛酸炔諾酮等，其中庚酸炔諾酮與戊酸雌二醇復(fù)方注射液作為長(zhǎng)效避孕藥可以持續(xù)避孕1個(gè)月，是一種非常理想的避孕制劑。作為復(fù)方庚酸炔諾酮注射液主要成分的庚酸炔諾酮，其雜質(zhì)檢測(cè)方法各國(guó)藥典均沒(méi)有收載，且文獻(xiàn)報(bào)告極少。

現(xiàn)有技術(shù)中關(guān)注點(diǎn)多為庚酸炔諾酮的制劑含量檢測(cè)方法，或者使用液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)方法檢測(cè)炔基類甾體化合物，諸如：

文獻(xiàn)“薄層掃描測(cè)定復(fù)方炔諾酮庚酸酯注射液中炔諾酮庚酸醋的薄層層析條件探討”，金宜紉，《中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)》, 1988, 3: 004，公開(kāi)了用薄層掃描測(cè)定復(fù)方炔諾酮庚酸酯注射液中主藥和兩個(gè)輔料的方法。

文獻(xiàn)“HPLC Analysis of Injectable Contraceptive Preparation Containing Norethisterone Enanthate and Estradiol Valerate”，Journal of liquid chromatography, 1990, 13(17): 3473-3479，公開(kāi)了一種復(fù)方庚酸炔諾酮注射液的高效液相色譜分析方法，方法為：色譜柱：2 ZOrbaX-Cg column (250 X 46mm I.D.)；檢測(cè)波長(zhǎng)：222nm；柱溫：15℃；流動(dòng)相：甲醇：水=85：1。此方法主要用來(lái)分析復(fù)方庚酸炔諾酮注射液中庚酸炔諾酮與戊酸雌二醇的含量。

公開(kāi)號(hào)為CN103389351A的中國(guó)發(fā)明，公開(kāi)了一種液相-串聯(lián)質(zhì)譜同時(shí)檢測(cè)9種炔基類甾體激素的方法，可同時(shí)檢測(cè)包括炔諾酮、庚酸炔諾酮在內(nèi)的多種化合物。

眾所周知，藥物雜質(zhì)對(duì)用藥安全影響非常大，藥物副作用在很大比例上都來(lái)自雜質(zhì)的問(wèn)題。藥物雜質(zhì)來(lái)源一般包括藥物制備工藝中的中間體、副產(chǎn)物以及降解產(chǎn)物。現(xiàn)有公開(kāi)文獻(xiàn)中研究對(duì)象多為庚酸炔諾酮的制劑含量檢測(cè)方法，或者使用液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)方法檢測(cè)炔基類甾體化合物，對(duì)于實(shí)際原料藥生產(chǎn)過(guò)程中潛在的雜質(zhì)，如中間體、降解產(chǎn)物等均沒(méi)有涉及，也沒(méi)有相關(guān)的雜質(zhì)分析方法可以同時(shí)適用于炔諾酮衍生物產(chǎn)品和合成該類產(chǎn)品所涉及到的中間體的雜質(zhì)檢測(cè)。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)存在的不足和缺點(diǎn)，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種炔諾酮衍生物及其中間體的HPLC雜質(zhì)分析方法。該方法研究參照并符合《中國(guó)藥典》2010版二部附錄VD對(duì)高效液相色譜法的規(guī)定。

具體說(shuō)來(lái)，發(fā)明人提供如下的技術(shù)方案：

一種炔諾酮衍生物及其中間體的雜質(zhì)檢測(cè)分析方法，包括：

（1）HPLC色譜分析主要參數(shù)：

a、色譜柱選用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；

b、流動(dòng)相梯度洗脫，其中：流動(dòng)相的組成為水、甲醇和乙腈，0～25min，按體積百分比，流動(dòng)相水:甲醇:乙腈=45%～20% : 0%～35% : 30%～73% ，水+乙醇+乙腈=100%；

c、檢測(cè)波長(zhǎng)為230～254nm；

（2）檢測(cè)方法：

取測(cè)試樣品炔諾酮衍生物或其中間體適量，精密稱定甲醇溶解并稀釋成一定濃度的樣品溶液，搖勻，進(jìn)樣，在適當(dāng)流速和柱溫下進(jìn)行高效液相色譜分析，記錄色譜圖。

作為優(yōu)選，所述的炔諾酮衍生物選自符合式I結(jié)構(gòu)的化合物，所述的中間體選自符合式II結(jié)構(gòu)的化合物，

式

其中，R為-COCH₃，-CO(CH₂)₄CH₃，-CO(CH₂)₅CH₃，-CO(CH₂)₆CH₃；

式

其中R’為 -H，-CH₂OH。

作為優(yōu)選，所述的步驟（2）中流速為1～2ml/min。更優(yōu)選1.5ml/min。

作為優(yōu)選，所述的步驟（2）中柱溫為20～40℃。更優(yōu)選30℃。