[發明專利]一種檢測水中大腸埃希氏菌的方法和檢測培養液

有效

• 申請號: 201410354559.4
• 申請日: 2014-07-24
• 公開（公告）號: CN104087652B
• 公開（公告）日: 2017-01-11
• 發明（設計）人: 單旭亮;毛芳芳;崔海松
• 申請（專利權）人: 杭州綠潔水務科技股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/06
• 分類號: C12Q1/06
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司11227
• 代理人: 趙青朵,馮瓊

1.一種檢測水中大腸埃希氏菌的方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟1、提供一系列不同濃度的大腸埃希氏菌菌懸液，過濾濃縮，分別加入到檢測培養液中培養，然后記錄各濃度下的大腸埃希氏菌菌懸液的特征時間，所述特征時間為各濃度下的大腸埃希氏菌菌懸液在365nm激發光下產生450nm熒光的熒光強度達到240時的時間，建立大腸埃希氏菌菌懸液濃度和特征時間的線性方程；

步驟2、將待測水樣過濾濃縮，加入步驟1所述檢測培養液培養，在其410nm吸光度有明顯變化的前提下，記錄待測水樣特征時間，將其代入到步驟1中的線性方程中獲得待測水樣中大腸埃希氏菌的濃度；

其中，所述檢測培養液包括Tryptone、硫酸鎂、硫酸錳、硫酸鋅、硫酸銨、氯化鈉、氯化鈣、亞硫酸鈉、吐溫-80、NaH₂PO₄·H₂O、K₂HPO₄·3H₂O、鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷、4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷、3號膽鹽。

2.根據權利要求1所述方法，其特征在于，所述檢測培養液包括：

Tryptone10.0g/L、硫酸鎂50-100mg/L、硫酸錳0.5-1mg/L、硫酸鋅0.5-1mg/L、硫酸銨5.0-10.0g/L、氯化鈉10.0g/L、氯化鈣50-100mg/L、亞硫酸鈉40-100mg/L、吐溫-800.5-2g/L、NaH₂PO₄·H₂O6.10g/L、K₂HPO₄·3H₂O2.75g/L、鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷250mg/L、4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷35mg/L、3號膽鹽1.0-3.0g/L。

3.根據權利要求1或2所述方法，其特征在于，所述過濾濃縮采用膜孔徑為0.45μm、膜直徑為47mm醋酸纖維素濾膜過濾濃縮。

4.一種檢測水中大腸埃希氏菌的檢測培養液，其特征在于，包括：

Tryptone、硫酸鎂、硫酸錳、硫酸鋅、硫酸銨、氯化鈉、氯化鈣、亞硫酸鈉、吐溫-80、NaH₂PO₄·H₂O、K₂HPO₄·3H₂O、鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷、4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷、3號膽鹽。

5.根據權利要求4所述檢測培養液，其特征在于，包括：

Tryptone10.0g/L、硫酸鎂50-100mg/L、硫酸錳0.5-1mg/L、硫酸鋅0.5-1mg/L、硫酸銨5.0-10.0g/L、氯化鈉10.0g/L、氯化鈣50-100mg/L、亞硫酸鈉40-100mg/L、吐溫-800.5-2g/L、NaH₂PO₄·H₂O6.10g/L、K₂HPO₄·3H₂O2.75g/L、鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷250mg/L、4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷35mg/L、3號膽鹽1.0-3.0g/L。