[發明專利]一種羅氏芬殘留檢測方法

無效

• 申請號: 201410354193.0
• 申請日: 2014-07-24
• 公開（公告）號: CN104140995A
• 公開（公告）日: 2014-11-12
• 發明（設計）人: 馬衛東;張錦文;吳國平
• 申請（專利權）人: 上海羅氏制藥有限公司
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18;C12R1/19
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術領域

本發明涉及一種殘留物含量到檢測方法，具體涉及一種羅氏芬殘留檢測方法。

背景技術

為了檢查清潔工作的有效性以及確認沒有羅氏芬交叉污染發生。本發明建立了羅氏芬生產區域以及其它有潛在交叉污染風險的區域中羅氏芬的檢測方法。

發明內容

本發明的目的在于，提供一種羅氏芬殘留檢測方法，以克服現有技術所存在的上述缺點和不足。

本發明所需要解決的技術問題，可以通過以下技術方案來實現：

一種羅氏芬殘留檢測方法，其特征在于，包括：

(1)制備平板；

(2)制備標準溶液，其中所述標準溶液為儲備液和標準稀釋液；

(3)采樣進行表面監測和空氣監測；

(4)測試

(4.1)標準曲線

(4.2)樣品添加和培養

(4.3)計算

b=Σxiyi-x‾ΣyiΣxi2-x‾Σxi,a=y‾-bx‾]]>

Y＝bX+a

精確測量每個抑菌圈直徑至0.1毫米；用以上公式得到標準曲線回歸方程，Y為抑菌圈直徑，X為羅氏芬濃度的lg值，將樣品抑菌圈直徑代入方程，計算出結果，所得的表面樣結果應為μg/m²，空氣樣為μg/m³。

在本發明中，羅氏芬殘留檢測方法還包括：(4.4)接受標準和測試頻率

(4.4.1)空氣監測

(4.4.2)表面監測

(4.4.3)采樣點位置分布；

(4.5)異常處理：遵照SOP-CB-0008。

其中，步驟(1)中，所述平板為AM1平板；AM1平板應臨用新配；配制1號抗生素培養基100毫升，121℃滅菌20分鐘，培養基冷卻至48±2℃；加入2毫升大腸桿菌接種菌液至100毫升培養基，輕搖混勻，避免產生泡沫；將培養基傾倒入生物檢定培養皿，確保制得的平板表面平整，避免氣泡，冷卻至固化。

其中，步驟(2)中，所述儲備液：準確稱取40毫克羅氏芬于100毫升容量瓶，使用純水溶解并定容，該溶液必須臨用新配；

所述標準稀釋液：將儲備液制成各個稀釋度的標準稀釋液。

其中，步驟(3)中，所述表面監測：用鑷子鑷取6毫米直徑的紙片擦拭一特定面積，用10×10cm²的不銹鋼框圈出的區域；采樣后的紙片放置于AM1平板上；

所述空氣監測：將一片直徑為12.7毫米的濾紙片放置于抽濾器中；調節真空泵抽氣量至大約每分鐘10升，每個采樣點抽取100升空氣；取出采好樣的紙片放置于AM1平板上；

其中，步驟(4.1)中，將紙片放置于培養基平板，滴加標準稀釋液，每個標準稀釋液滴加2個紙片；用6毫米紙片，每片分別加20微升標準稀釋液1～5；用12.7毫米紙片，每片分別加20微升標準稀釋液1～4，再加80微升純水至每片濾紙。

其中，步驟(4.2)中，對于表面監控，每個樣品濾片上加20μl純化水；對于空氣監控，每個樣品濾片上加100μl純化水；在30～35℃培養20～24小時；標準和樣品應在同一平板上。

本發明的有益效果：