[發明專利]一種羅氏芬殘留檢測方法

無效

• 申請號: 201410354193.0
• 申請日: 2014-07-24
• 公開（公告）號: CN104140995A
• 公開（公告）日: 2014-11-12
• 發明（設計）人: 馬衛東;張錦文;吳國平
• 申請（專利權）人: 上海羅氏制藥有限公司
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18;C12R1/19
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

1.一種羅氏芬殘留檢測方法，其特征在于，包括：

(1)制備平板；

(2)制備標準溶液，其中所述標準溶液為儲備液和標準稀釋液；

(3)采樣進行表面監測和空氣監測；

(4)測試

(4.1)標準曲線

(4.2)樣品添加和培養

(4.3)計算

b=Σxiyi-x‾ΣyiΣxi2-x‾Σxi,a=y‾-bx‾]]>

Y＝bX+a

精確測量每個抑菌圈直徑至0.1毫米；用以上公式得到標準曲線回歸方程，Y為抑菌圈直徑，X為羅氏芬濃度的lg值，將樣品抑菌圈直徑代入方程，計算出結果，所得的表面樣結果應為μg/m²，空氣樣為μg/m³。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：還包括：(4.4)接受標準和測試頻率

(4.4.1)空氣監測

(4.4.2)表面監測

(4.4.3)采樣點位置分布；

(4.5)異常處理：遵照SOP-CB-0008。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(1)中，所述平板為AM1平板；AM1平板應臨用新配；配制1號抗生素培養基100毫升，121℃滅菌20分鐘，培養基冷卻至48±2℃；加入2毫升大腸桿菌接種菌液至100毫升培養基，輕搖混勻，避免產生泡沫；將培養基傾倒入生物檢定培養皿，確保制得的平板表面平整，避免氣泡，冷卻至固化。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(2)中，

所述儲備液：準確稱取40毫克羅氏芬于100毫升容量瓶，使用純水溶解并定容，該溶液必須臨用新配；

所述標準稀釋液：將儲備液制成各個稀釋度的標準稀釋液。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(3)中，

所述表面監測：用鑷子鑷取6毫米直徑的紙片擦拭一特定面積，用10×10cm²的不銹鋼框圈出的區域；采樣后的紙片放置于AM1平板上；

所述空氣監測：將一片直徑為12.7毫米的濾紙片放置于抽濾器中；調節真空泵抽氣量至大約每分鐘10升，每個采樣點抽取100升空氣；取出采好樣的紙片放置于AM1平板上。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(4.1)中，將紙片放置于培養基平板，滴加標準稀釋液，每個標準稀釋液滴加2個紙片；用6毫米紙片，每片分別加20微升標準稀釋液1～5；用12.7毫米紙片，每片分別加20微升標準稀釋液1～4，再加80微升純水至每片濾紙。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(4.2)中，對于表面監控，每個樣品濾片上加20μl純化水；對于空氣監控，每個樣品濾片上加100μl純化水；在30～35℃培養20～24小時；標準和樣品應在同一平板上。