[發明專利]一種同時制備低蛋白大米及大米免疫肽的方法

有效

• 申請號: 201410352958.7
• 申請日: 2014-07-23
• 公開（公告）號: CN104082673A
• 公開（公告）日: 2014-10-08
• 發明（設計）人: 吳樂斌;劉漢民;常繼辰;劉紅彥
• 申請（專利權）人: 中恩（天津）營養科技有限公司
• 主分類號: A23L1/10
• 分類號: A23L1/10;A23L1/307;C12P21/06;C12P21/00
• 代理公司: 天津市三利專利商標代理有限公司 12107
• 代理人: 李蕊

1.一種同時制備低蛋白大米及大米免疫肽的方法，其特征在于：具體步驟如下：

A.清洗：

常溫下，將大米與水投入反應容器中，大米和水的重量比為1:2～5，攪拌1～5分鐘，排掉清洗液，重復清洗1～5次，排掉清洗液，瀝干大米；

B.高溫處理：

將大米加入到60～100℃的水溶液中攪拌1～10分鐘，然后倒出洗液，加水冷卻清洗，瀝干大米，重復1～6次，洗液可回收；

C.發酵：

將大米、水、乳酸菌和乳酸添加到發酵容器中，其中大米和水的重量比為1:1～6，控制每公斤發酵液中乳酸菌菌數為10⁷～10¹³，乳酸添加量為每公斤發酵液中加50％～80％乳酸50～500μL，發酵溫度為25～50℃，時間為8～20小時，發酵終點為發酵液pH為3.5～4.5；發酵結束后將大米和發酵液分離，大米用水清洗1～6次，將清洗液與發酵液一并回收，采用135～150℃，滅菌4～6秒，即為發酵產酸溶出的蛋白溶液；

D.除雜酶解：

向反應容器中加入水，控制大米和水的質量比例為1:1～6，采用淀粉酶、纖維素酶和脂肪酶水解大米，其中淀粉酶投入量為大米重量0.05～0.30％，反應溫度為50～65℃，反應pH控制為5.5～7.0，時間為10～60分鐘；纖維素酶投入量為大米重量的0.05～0.30％，反應溫度為35～50℃，pH控制為4.0～6.0，時間為1～4小時；脂肪酶投入量為大米重量的0.05～0.20％，反應溫度為40～55℃，pH控制為6.5～8.0，時間為1～4小時；酶解結束后，將酶解液放出，用水清洗大米兩次，將洗液與酶解液一并回收；

E.第一道大米蛋白的制備：

將步驟C、D反應液及洗液合并，調節pH至5.0～5.5，用離心機2000～5000rpm離心10～30分鐘，獲得沉淀；向沉淀中加入水和0.02～0.10％淀粉酶，于50～65℃酶解10～30分鐘，經相同離心方式離心，沉淀即為第一道大米蛋白產物；

F.第二道大米蛋白的制備：

將步驟D處理后的大米與水混合，大米與水的重量比為1:1～6，投入谷氨酰胺酶，投入量為大米重量的0.05～0.30％，反應溫度為30～65℃，反應pH控制為5.0～7.0，酶解時間為1～3小時；投入蛋白酶，其中蛋白酶投入量為大米重量的0.2～4.0％，反應溫度為30～60℃，反應pH控制為3.5～8.0，酶解時間為1～8小時；反應結束后分離反應液，用水清洗大米兩次，將洗液與反應液一并回收，獲得的大米即為低蛋白大米；然后將洗液與反應液用離心機2000～5000rpm離心10～30分鐘，取上清液，棄除沉淀；

G.大米免疫肽的制備：

將步驟E得到的產物與水混合，沉淀與水的質量比例為1:1～6，用蛋白酶進行酶解，蛋白酶投入量為水重的0.2～4.0％，反應溫度為30～60℃，pH控制為3.5～8.0，時間為1～6小時；酶解結束后，將反應溶液用離心機2000～5000rpm離心10～30分鐘，取上清液后與步驟F得到的上清液混合，于90℃滅酶5～20min；將滅酶后的上清液經超濾膜系統和納濾膜分別進行濃縮后，對濃縮液進行噴霧干燥，得到固體粉末即為所述的大米免疫肽；

H.低蛋白大米干燥：

將得到的低蛋白大米用水清洗干凈后，進行干燥。

2.根據權利要求1所述的同時制備低蛋白大米及大米免疫肽的方法，其特征在于：所述乳酸菌為乳桿菌屬。

3.根據權利要求2所述的同時制備低蛋白大米及大米免疫肽的方法，其特征在于：所述乳酸菌為植物乳桿菌、短乳桿菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、保加利亞乳桿菌和德氏乳桿菌中的任意一種或兩種。

4.根據權利要求3所述的同時制備低蛋白大米及大米免疫肽的方法，其特征在于：所述乳酸菌為植物乳桿菌、短乳桿菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、保加利亞乳桿菌和德氏乳桿菌在兩種組合使用時，二者菌數控制在1～2:2～1之間。

5.根據權利要求1所述的同時制備低蛋白大米及大米免疫肽的方法，其特征在于：所述原料大米可以替換為薏米、高粱米、黑米、大麥或燕麥。

6.根據權利要求1所述的同時制備低蛋白大米及大米免疫肽的方法，其特征在于：所述淀粉酶、纖維素酶和脂肪酶的添加順序是依次加入到料液中，當一種酶作用結束后再投入另一種，并保證每種酶在其適宜的溫度和pH下酶解。