[發明專利]檢測阿德呋啉的時間分辨熒光免疫試劑盒及檢測方法

在審

• 申請號: 201410352357.6
• 申請日: 2014-07-23
• 公開（公告）號: CN105301246A
• 公開（公告）日: 2016-02-03
• 發明（設計）人: 洪霞;薛永來;杜霞
• 申請（專利權）人: 江蘇維賽科技生物發展有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/533
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢測阿德呋啉的時間分辨熒光免疫分析試劑盒，其特征在于：由多孔包被板，緩沖液，阿德呋啉標準品，阿德呋啉的抗體凍干品，銪標記的羊抗鼠抗體，洗滌液和增強液所組成。

2.一種根據權利要求1所述檢測阿德呋啉的時間分辨熒光免疫分析試劑盒的檢測方法，包括免疫原、包被原和單克隆抗體的制備以及樣品前處理，其特征在于：

(1)將阿德呋啉與牛血清白蛋白偶聯，得到免疫原；

(2)將阿德呋啉與卵血清蛋白偶聯，得到包被原；

(3)用步驟(1)的免疫原免疫小鼠，通過雜交瘤技術，得到分泌抗阿德呋啉的單克隆抗體的雜交瘤細胞株；

(4)以體內誘生腹水法大量制備抗體，使用ProteinG柱進行純化，獲得抗阿德呋啉的單克隆抗體

(5)用步驟(2)的包被原包被固相載體；

(6)將動物組織先經過酸解提取后，再過MAX柱凈化，最后加入衍生試劑和催化劑進行處理，得到待測產物；

(7)將步驟(6)的待檢物進行測量熒光強度cps，對照標準曲線計算樣品中的阿德呋啉含量。

3.根據權利要求1所述檢測阿德呋啉的時間熒光免疫分析法試劑盒的檢測方法，其特征在于：所述的固相載體是多孔包被板，采用96孔的多微孔包被板作為固相載體。

4.根據權利要求1所述檢測阿德呋啉的時間熒光分辨免疫分析法試劑盒的檢測方法，其特征在于：所述的衍生試劑是丁胺。

5.根據權利要求1所述檢測阿德呋啉的時間分辨熒光免疫分析法試劑盒的檢測方法，其特征在于：所述的催化劑是腈基磷酸二乙酯。

6.根據權利要求1所述檢測阿德呋啉的時間熒光免疫分析法試劑盒的檢測方法，其特征在于：所述步驟(6)和(7)具體為取包被有阿德呋啉-OVA的微孔包被板，加入50μL處理好的樣品到各自的微孔中，加入50μL以緩沖液稀釋的阿德呋啉抗體，25~37℃振蕩0.5~1小時，洗滌液洗三次，加以緩沖液稀釋的100μLEu³⁺-羊抗鼠抗體，25~37℃振蕩0.5~1小時，洗滌液洗六次，加200μL增強液振蕩5分鐘后測量熒光強度cps，從標準曲線計算樣品中的阿德呋啉含量。