[發明專利]用于腹腔開放治療及修復的仿生腹膜及其制備方法

有效

• 申請號: 201410346300.5
• 申請日: 2014-07-18
• 公開（公告）號: CN104162186B
• 公開（公告）日: 2017-01-04
• 發明（設計）人: 任建安;王革非;吳秀文;陳國璞;周波;陳軍;顧國勝;黎介壽
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍南京軍區南京總醫院
• 主分類號: A61L27/48
• 分類號: A61L27/48;A61L27/52;A61L27/56;A61L27/54
• 代理公司: 深圳市道臻知識產權代理有限公司44360
• 代理人: 陳琳

1.一種用于腹腔開放治療及修復的仿生腹膜，其特征在于：包括水凝膠，搭載于該水凝膠上的聚乳酸－羥基乙酸微球，以及覆蓋于水凝膠及聚乳酸－羥基乙酸微球上的納米纖維膜。

2.根據權利要求1所述的用于腹腔開放治療及修復的仿生腹膜，其特征在于：所述的水凝膠包括纖維連接蛋白與細胞作用位點的聚乙二醇雙馬來酸單酯、I型膠原與細胞結合位點的聚乙二醇雙丙烯酸酯和光引發劑艷固佳。

3.根據權利要求1所述的用于腹腔開放治療及修復的仿生腹膜，其特征在于：所述的聚乳酸－羥基乙酸微球是由乳酸和羥基酸聚合而成的聚乳酸－羥基乙酸共聚物。

4.根據權利要求1所述的用于腹腔開放治療及修復的仿生腹膜，其特征在于：所述的納米纖維膜包括聚乙二醇聚醚氨酯脲和富血小板血漿，其體積比為1:1-1.5。

5.根據權利要求4所述的用于腹腔開放治療及修復的仿生腹膜，其特征在于：所述的納米纖維膜還包括可復合骨髓來源間充質干細胞，所述的納米纖維膜為多孔材料，干細胞的含量為每100μl細胞培養液含2.5×10⁵BMSCs，每100μl細胞培養液加入每孔底層納米纖維膜介質。

6.一種仿生腹膜的制備方法，其包括以下步驟：

S1制備水凝膠：將濃度分別為0.5-2％(w/v)、8-10％(w/v)和0.05-0.2％(w/v)的聚乙二醇雙馬來酸單酯、聚乙二醇雙丙烯酸酯和光引發劑Irgacure溶入磷酸鹽緩沖液PBS中，置于紫外燈下15-18cm處照射10-15min，成膠完全后，PBS溶液漂洗3-5次；

S2在水凝膠上搭載聚乳酸－羥基乙酸微球：該聚乳酸－羥基乙酸微球是由乳酸和羥基酸聚合而成的聚乳酸－羥基乙酸共聚物，并將該共聚物搭載于水凝膠上；

S3制備納米纖維膜：將聚乙二醇聚醚氨酯脲加入到六氟異丙醇中，攪拌至溶解，得到濃度為10-15％(w/v)的聚合物溶液，并通過紡絲設備制得納米纖維膜；

S4覆膜：將上述納米纖維膜覆蓋于搭載有聚乳酸－羥基乙酸微球的水凝膠上，得到仿生腹膜。

7.根據權利要求6所述的仿生腹膜的制備方法，其特征在于：所述的步驟(3)中，所述的紡絲設備為靜電紡絲機，通過注射器吸取聚合物溶液固定于靜電紡絲機上微量推進進行紡絲和噴涂制得納米纖維膜。

8.根據權利要求7所述的仿生腹膜的制備方法，其特征在于：所述的步驟(3)中，分別用注射器吸取富血小板血漿與聚合物溶液一起進行紡絲和噴涂得到納米纖維膜上。

9.根據權利要求7所述的仿生腹膜的制備方法，其特征在于：所述的步驟(3)中，將含2.5×10⁵BMSC的100μl細胞培養液加入每孔底層介質，在5％CO₂，37℃的條件下培養，每隔一天更換培養液一次，得到干細胞培養液。

10.根據權利要求9所述的仿生腹膜的制備方法，其特征在于：所述的干細胞培養液通過注射器吸取后，與聚合物溶液一起紡絲和噴涂制得納米纖維膜。

11.根據權利要求8或10所述的仿生腹膜的制備方法，其特征在于：所述的聚乙二醇聚醚氨酯脲在靜電紡織機上紡絲的參數設置為：微量推進速度：1.5ml/h；毛細管電壓：+12KV；靜電紡織機的噴頭和滾筒距離：20cm。

12.根據權利要求8或10所述的仿生腹膜的制備方法，其特征在于：所述的干細胞培養液在靜電紡織機上噴涂的參數設置為：微量推進速度：0.2ml/min；毛細管電壓：+7KV；靜電紡織機的噴頭和滾筒距離：4cm。

13.根據權利要求12所述的仿生腹膜的制備方法，其特征在于：所述滾筒參數設置為：滾筒電壓：-4KV；滾筒旋轉速度：250rmp/min；橫向移動速度：0.15cm/s；橫向移動幅度：8cm。

14.根據權利要求6所述的仿生腹膜的制備方法，其特征在于：所述的聚乳酸－羥基乙酸微球制備方法包括：

S21將重量比為1：1的乳酸和羥基酸共100mg溶解在4ml二氯甲烷(CH₂Cl₂)中，制成油相；

S22將成纖維細胞生長因子樣品溶于500μl去離子水中形成水相；

S23將該水相加入到油相中，混合物用超聲探針震蕩處理，勻化后形成初乳(W1/O)，將0.5gPVA加入100ml去離子水中形成含0.5％(w/v)PVA的油相(W2)，將初乳倒入油相(W2)中，機械攪拌器400rpm攪拌4h，攪拌過程中溶劑蒸發，得到膠態懸浮的聚乳酸－羥基乙酸微球。