[發明專利]一種二肽基肽酶IV抑制肽及其制備和應用

有效

• 申請號: 201410344609.0
• 申請日: 2014-07-18
• 公開（公告）號: CN105273081B
• 公開（公告）日: 2018-11-13
• 發明（設計）人: 鄒漢法;靳艷;晏嘉澤
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: C07K14/78
• 分類號: C07K14/78;C12P21/06;A61K38/39;A23L33/18;A61P3/10;A61P3/06;A61P9/12;A61P3/04;A61P19/10
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 馬馳

本發明涉及一種二肽基肽酶IV抑制劑及其制備，其以鹿膠原肽為活性成份，具有二肽基肽酶IV抑制活性。通過本發明制備的二肽基肽酶IV抑制劑，可應用于食品添加劑、功能食品、藥品等領域，具有良好的應用前景。

技術領域

本發明屬于生物技術領域。

本發明涉及一種二肽基肽酶IV抑制肽及其制備，其以鹿膠原肽為活性成份，具有二肽基肽酶IV抑制活性。通過本發明制備的二肽基肽酶IV抑制肽，可應用于食品添加劑、功能食品、藥品等領域，具有良好的應用前景。

背景技術

二肽基肽酶IV(dipeptidyl peptidase-IV DPP-IV)(EC3.4.14.5)是一種絲氨酸蛋白酶，廣泛分布于人體內。DPP-IV通過對多肽的剪切使其失活，從而達到調節生理功能的作用。DPP-IV優先水解N-末端第二位上具有脯氨酸(Pro)或丙氨酸(Ala)的蛋白質。其作用底物包括：胰高血糖素樣肽-1(GLP21_7-36)、抑胃肽(GIP_1-42)、神經肽(NPY)、YY肽(PYY)以及胰多肽家族(PP-family)等。這些物質的共同特點就是N-末端第二位的氨基酸殘基或者是脯氨酸或者是丙氨酸殘基。DPP-IV通過作用于以上多肽底物而在糖尿病、葡萄糖耐量、肥胖、食欲調節、高血脂癥、骨質疏松、神經肽新陳代謝和T-細胞激活等相關疾病中起著重要的作用。因此，體內給予DPP-IV抑制劑可預防相關底物肽的N-末端降解，從而保障人體機能正常運行。

DPP-IV將完整的GLP-1和GIP反應切斷N-末端2個氨基酸殘基后，使其失活從而影響GLP-1和GIP相關的血糖調節等生理反應。體內給予DPP-IV抑制劑可預防GLP-1和GIP的N-末端降解，使胰島素分泌物增加從而改善葡萄糖耐量。鑒于DPP-IV抑制劑與血糖代謝的密切關系，DPP-IV抑制劑已成為新型2型糖尿病藥物的研究熱點。

DPP-IV抑制劑通過影響胰島素對葡萄糖的敏感性及β細胞，提高周圍組織對胰島素的敏感性，促進乳糜微粒和極低密度脂蛋白的分解，從而起到降脂的作用?；谕瑯拥睦碛?，DPP-IV也同時具有減肥等功能。因此具有廣闊的應用前景。

發明內容

本發明的目的是提供一種二肽基肽酶IV抑制肽及其制備；其以鹿膠原肽為活性成份，具有二肽基肽酶IV抑制活性。本發明通過酶解、分離純化的方法制備鹿膠原肽，制備工藝簡單、條件溫和，具有良好的應用前景。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案如下：

(1)以新鮮的鹿皮、鹿筋等為原料，鹿皮或鹿筋脫脂處理后用純水清洗干凈，剪為2～3平方厘米的碎片，鹿皮或鹿筋碎片按照1:1～100質量比加入0.01M緩沖液，再按1:10～500質量比加入蛋白酶，于20～50℃攪拌反應1～10小時。將上述反應液的pH用1M NaOH或1MHCl調至6～8，加入復合酶進行酶解，加酶量為反應物質量的0.1～1％，于20～70℃攪拌反應1～10小時，反應結束后90℃滅活20min。將上述反應液5000rpm離心5min，收集上清，冷凍干燥得到鹿膠原肽。

(2)干燥的鹿膠原肽用緩沖溶液或醇水溶液溶解，上凝膠柱分離，獲得具有二肽基肽酶IV抑制活性的組分。

蛋白質水解酶為胃蛋白酶、胰蛋白酶、風味蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、堿性蛋白酶或中性蛋白酶其中兩種、三種、四種或五種酶組合使用。

以鹿膠原肽作為活性成份，用于藥品、功能食品或食品的制備中；

其可制備成任何形式，例如口服劑型：粉劑、片劑、膠囊劑、軟膠囊劑、水性藥物、糖漿劑、酊劑、丸劑、散劑、小包、或顆粒劑；

外用局部制劑：乳膏、軟膏、乳液、凝膠、半固體膏、貼劑糊膏、噴霧劑或氣霧劑；

注射劑：溶液、懸劑、或乳劑。

本發明的特點如下：