[發(fā)明專利]一種二肽基肽酶IV抑制肽及其制備和應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201410344609.0 | 申請(qǐng)日： | 2014-07-18 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN105273081B | 公開(kāi)（公告）日： | 2018-11-13 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 鄒漢法;靳艷;晏嘉澤 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 中國(guó)科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所 |
| 主分類號(hào)： | C07K14/78 | 分類號(hào)： | C07K14/78;C12P21/06;A61K38/39;A23L33/18;A61P3/10;A61P3/06;A61P9/12;A61P3/04;A61P19/10 |
| 代理公司： | 沈陽(yáng)科苑專利商標(biāo)代理有限公司 21002 | 代理人： | 馬馳 |
| 地址： | 116023 *** | 國(guó)省代碼： | 遼寧;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 二肽 肽酶 iv 抑制 及其 制備 應(yīng)用 | ||
1.一種二肽基肽酶IV抑制劑，其特征在于：其以鹿膠原肽為活性成份，鹿膠原肽具有二肽基肽酶IV抑制活性；
所述二肽基肽酶IV抑制劑的制備方法為：
（1）以新鮮的鹿皮或鹿筋中的一或二種以上為原料，將鹿皮或鹿筋于1～30% NaOH 中50～100℃煮10～30分鐘進(jìn)行脫脂處理后用純水清洗干凈，剪為2～3平方厘米的碎片，鹿皮或鹿筋碎片按照原料：緩沖液1:1～100質(zhì)量比加入0.01～1M緩沖液，再按酶：原料1:10～500質(zhì)量比加入蛋白酶進(jìn)行單酶酶解，于20～50℃攪拌反應(yīng)1～10小時(shí)；將上述反應(yīng)液的pH用0.1～1M NaOH或0.1～1M HCl調(diào)至6～8，加入復(fù)合酶進(jìn)行酶解，加酶量為反應(yīng)物質(zhì)量的0.1～1%，于20～70℃攪拌反應(yīng)1～10小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后70～100℃滅活5～30min；將上述反應(yīng)液2000～8000rpm離心3～10min，收集上清，冷凍干燥得到鹿膠原肽；
（2）干燥的鹿膠原肽用其質(zhì)量3～5倍10～50%甲醇水溶液或緩沖液溶解，上Sephadex系列凝膠柱，用甲醇水溶液或緩沖液淋洗分離并收集洗脫液，含量最高的組分為具有二肽基肽酶IV抑制活性的組分；
所述單酶酶解所用的蛋白酶為胃蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶其中一種；
所述復(fù)合酶為胰蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、堿性蛋白酶或中性蛋白酶其中兩種、三種、四種或五種酶組合使用，復(fù)合酶中單酶以相同的質(zhì)量比例混合。
2.按照權(quán)利要求1所述的二肽基肽酶IV抑制劑，其特征在于：所述緩沖液為：磷酸緩沖液、Tris-HCl緩沖液、或醋酸緩沖液中的一種。
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