[發(fā)明專利]一種用于復(fù)方丹參滴丸的一測多評檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410342437.3
• 申請日: 2014-07-17
• 公開（公告）號(hào): CN105277643B
• 公開（公告）日: 2018-10-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 佟玲;周水平;孫鶴;孫萬陽;黃競怡
• 申請（專利權(quán)）人: 天士力醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88
• 代理公司: 北京華科聯(lián)合專利事務(wù)所(普通合伙) 11130
• 代理人: 王為

1.一種復(fù)方丹參滴丸的一測多評檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)將復(fù)方丹參滴丸制備成測試液；

2)用超高效液相色譜儀測定測試液中原兒茶醛含量；

3)使用相對校正因子計(jì)算樣品中丹參素、丹酚酸B、丹酚酸A、迷迭香酸和紫草酸的含量；

其中，步驟2)的測定方法為：

用超高效液相色譜儀分別測定待測樣品溶液和對照品溶液中原兒茶醛的峰面積，使用外標(biāo)一點(diǎn)法或工作曲線法計(jì)算原兒茶醛含量；

儀器：選擇最高耐受壓力大于6000psi或400bar的高效液相色譜儀；

色譜柱：選擇亞2μm填料尺寸的色譜柱；

流動(dòng)相選用如下三種方案中的一種：

a、溶劑A為醋酸鹽緩沖溶液，其中含0.3-0.5％乙酸及0.05-0.1％三乙胺–溶劑B為乙腈；

b、溶劑A為0.1-0.3％甲酸水溶液–溶劑B為乙腈；

c、溶劑A為0.1-0.3％醋酸水溶液–溶劑B為乙腈；

梯度洗脫程序選用如下洗脫方案中的一種：

①0～1min，8％–12％B，1～3min，12％–17％B，3～6min，17％–20％B，6～8min，20％–23％B,8～10min，23％–27％B；

②0～1min，5％-10％B，1～3min，10％–15％B，3～6min，17％–20％B，6～8min，20％–23％B,8～10min，23％–27％B；

③0～1min，10％–14％B，1～3min，14％–20％B，3～6min，20％–23％B，6～8min，23％–27％B,8～10min，27％–30％B；

④0～0.5min，8％–12％B，0.5～2.5min，12％–17％B，2.5～5.5min，17％–20％B，5.5～7.5min，20％–23％B,7.5～9.5min，23％–27％B；

⑤0～3min，8％–12％B，3～5min，12％–17％B，5～8min，17％–20％B，8～10min，20％–23％B,10～12min，23％–27％B；

流速：0.36-0.44mL/min；

柱溫：25-35℃；

進(jìn)樣量：1-5μL；

PDA檢測器波長：279-283nm，327-331nm；或可變波長檢測器，波長程序：0～3min，281nm，3～8min，329nm，8～10min，281nm。

2.根據(jù)權(quán)利要求1的檢測方法，其特征在于，

其中，步驟1)將復(fù)方丹參滴丸制備成測試液；方法如下：取復(fù)方丹參滴丸20-30粒，精密稱定，于20-30mL量瓶中，加入15-25mL水，超聲5-15min，待冷卻至室溫，定容至20-30mL，過0.2-0.3μm的濾膜，得到濾液即為待測試液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1的檢測方法，其特征在于，

其中，步驟1)將復(fù)方丹參滴丸制備成測試液；方法如下：取復(fù)方丹參滴丸25粒，精密稱定，于25mL量瓶中，加入20mL二純水，超聲10min，待冷卻至室溫，定容至25mL，過0.22μm濾膜，得到濾液即為待測試液。

4.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，亞2μm填料尺寸的色譜柱為WatersACQUITY UPLC色譜柱或Dikma Endeavorsil色譜柱。

5.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，其中外標(biāo)一點(diǎn)法使用濃度為40μg/mL的原兒茶醛作為對照品，工作曲線法采用濃度范圍在10-100μg/mL的至少五個(gè)梯度的原兒茶醛作為對照品溶液。