[發明專利]一種核酸顯色劑及其應用有效
| 申請號: | 201410341974.6 | 申請日: | 2014-07-17 |
| 公開(公告)號: | CN104099419B | 公開(公告)日: | 2017-09-08 |
| 發明(設計)人: | 黃昱陽;熊槐;杜正平;曹以誠 | 申請(專利權)人: | 廣州華峰生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68;C12M1/24 |
| 代理公司: | 廣州三環專利商標代理有限公司44202 | 代理人: | 郝傳鑫,付靜 |
| 地址: | 510663 廣東省廣州市經濟技*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 核酸 顯色 及其 應用 | ||
1.一種核酸顯色劑,其特征在于:至少含有花青類染料、花青類染料穩定劑和固定化劑;其中,所述花青類染料穩定劑包括四戊基銨類化合物,所述固定化劑包括高分子聚合物、糖類或兩者的混合物;
所述花青類染料的含量為被預定量的所述核酸顯色劑稀釋為100~250X時的量,所述花青類染料穩定劑在所述核酸顯色劑中的濃度為10~100mM,所述固定化劑的含量為保持預定量的核酸顯色劑經真空干燥后為半固態時的量;
所述固定化劑為糖類和高分子聚合物的混合物,其中所述糖類的濃度16%~55%(w/v),所述高分子聚合物的濃度為0.05%~3%(w/v);
所述核酸顯色劑經過真空干燥處理,為半固態;
所述固定化試劑中的糖類為海藻糖、蔗糖、聚蔗糖、葡聚糖中的一種或幾種的混合物;
所述高分子聚合物為聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纖維素和聚丙烯酰胺中的一種或幾種的混合物。
2.如權利要求1所述的核酸顯色劑,其特征在于:所述四戊基銨類化合物為四戊基氯化銨、四戊基溴化銨、四戊基氫氧化銨中的一種或幾種的混合物。
3.如權利要求1所述的核酸顯色劑,其特征在于:所述花青類染料為SYBR Green I、SYBR Green II、SYBR Gold、GelStar中的一種或幾種的混合物。
4.如權利要求3所述的核酸顯色劑,其特征在于:所述花青類染料被溶解在DMSO中。
5.一種PCR管,其特征在于:所述PCR管的管蓋中粘附有如權利要求1~4中任一項所述的核酸顯色劑。
6.如權利要求5所述的PCR管的制備方法,其特征在于:將5~10μL如權利要求1~4任一所述的核酸顯色劑滴加在PCR的管蓋中央,然后對滴加有所述核酸顯色劑的PCR管蓋進行真空干燥處理,蒸發所述核酸顯色劑中的水分,使其成為半固態,即可制得所述PCR管。
7.如權利要求1~4任一所述的核酸顯色劑的應用,其特征在于:所述核酸顯色劑可用于肉眼判讀在其中進行的核酸擴增反應產物的陰性或陽性。
8.如權利要求7所述的核酸顯色劑的應用,其特征在于:所述核酸擴增反應為環介導等溫擴增反應。
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