[發(fā)明專利]一種從馬比木中提取分離喜樹堿的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410336367.0
• 申請(qǐng)日: 2014-07-15
• 公開（公告）號(hào): CN105272990A
• 公開（公告）日: 2016-01-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 葛發(fā)歡;李迎霞
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中山大學(xué);廣州中大南沙科技創(chuàng)新產(chǎn)業(yè)園有限公司
• 主分類號(hào): C07D491/22
• 分類號(hào): C07D491/22
• 代理公司: 廣州凱東知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44259
• 代理人: 姚迎新

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及提取分離技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種從馬比木中提取分離喜樹堿的方法。

背景技術(shù)

喜樹堿屬于喹啉類生物堿，該分子為五環(huán)結(jié)構(gòu),含有一個(gè)吡咯[3,4-b]喹啉環(huán)(環(huán)A、B、C),一個(gè)共軛的吡啶酮環(huán)(環(huán)D)和一個(gè)六元α-羥基內(nèi)酯環(huán)(環(huán)E)，分子式為C₂₀H₁₈O₆，喜樹堿中文名:(S)-4-乙基-4-羥基-1H-吡喃(3’，4’，6’，7)氮茚(l，2-b)-哇琳-3，14-(4H，12H)-二酮，英文名：[(S)-4-ethy-4-hydroxyl-1H-pyrano-(3’，4’，6’，7)indolizino(l，2-b)-quinoline-3，14-(4H，12H)-(4H，12H)-dione]]，具體結(jié)構(gòu)如下：

1966年美國(guó)化學(xué)家Wall和Wani首先從珙桐科植物喜樹(CamptothecaacuminataDecne)中提取出喜樹堿，之后喜樹作為我國(guó)特有的一種植物一直作為喜樹堿提取的重要植物來(lái)源。

喜樹堿在喜樹各器官中的含量分布差異很大，不同學(xué)者的研究結(jié)果也不一致,這可能是由于采樣部位、采樣時(shí)間、分析方法等引起的差異。楊磊等研究了不同生長(zhǎng)時(shí)期的喜樹中不同器官的喜樹堿含量，其中十年生喜樹中，喜樹葉中喜樹堿含量最高(0.1102％)，一級(jí)側(cè)根次之(0.0968％)，二級(jí)側(cè)根最低(0.063％)；氣候箱中培養(yǎng)20d的喜樹幼苗，其子葉己完全展開，真葉尚未長(zhǎng)出，此時(shí)喜樹堿在子葉中分布最多(0.2901％)，胚軸中次之(0.0951％)，果殼和胚根中分別為0.04197％和0.0246％，全株為0.0814％。但喜樹一直是毀林開田的砍伐對(duì)象，喜樹的野生種群已相當(dāng)少見，所以急需尋找新的喜樹堿來(lái)源。

近年來(lái)馬比木作為新的喜樹堿來(lái)源，越來(lái)越受到人們的重視。該植物含有喜樹堿,其根皮中的喜樹堿含量最高,是喜樹果的3～4倍,樹皮次之,莖、枝、葉、花序、果實(shí)和種子也含有喜樹堿,為極具價(jià)值的抗腫瘤藥物資源。

馬比木,茶茱萸科假柴龍樹屬馬比木[Nothapodytespittosporoides(Oliv.)Sleum]的根皮，別名公黃珠子、追風(fēng)傘，為茶茱萸科假柴龍屬植物，灌木或小喬木,分布于貴州、湖南、湖北、四川等地^[i]。根皮入藥能祛風(fēng)除濕，理氣散寒，主治風(fēng)寒濕痹，浮腫疝氣、關(guān)節(jié)疼痛等癥。

喜樹堿通過(guò)抑制腫瘤細(xì)胞內(nèi)拓?fù)洚悩?gòu)酶I的活性而具抗癌效應(yīng)。目前，已有多種藥效好、毒副作用小的喜樹堿類抗癌新藥被篩選出來(lái)，其中Irinothecan和Topothecan已于1996年得到美國(guó)FDA的批準(zhǔn)用于臨床，其他的如9-硝基喜樹堿、10-羥基喜樹堿、Exatecan、Lurtotecan等處于臨床試驗(yàn)的喜樹堿類抗腫瘤新藥可能在今后幾年內(nèi)陸續(xù)上市，所有的喜樹堿類藥物均以喜樹堿為原料而合成，喜樹堿類藥物全球年銷售額約為10億美元。目前，喜樹堿唯一可行的市場(chǎng)來(lái)源仍然是從野生植物中提取，主要是喜樹(中國(guó))中提取，由于喜樹的生長(zhǎng)周期很長(zhǎng)，要8-15年才能結(jié)果，而且其內(nèi)喜樹堿的含量很低，含量只有萬(wàn)分之四。因此，野生喜樹植物資源遭到了嚴(yán)重的破壞，被列為重點(diǎn)保護(hù)植物。隨著臨床需求量的急劇增加，可持續(xù)獲取喜樹堿及類似物已成當(dāng)務(wù)之急。

馬比木中其內(nèi)的喜樹堿含量高達(dá)千分之一點(diǎn)五，從利用富含喜樹堿及類似物的馬比木中生產(chǎn)該類物質(zhì)，是喜樹堿藥源開發(fā)的主攻方向之一。但關(guān)于馬比木中喜樹堿的提取分離工藝還沒有詳細(xì)系統(tǒng)的研究。

目前生產(chǎn)上關(guān)于喜樹中喜樹堿的提取工藝，其流程為：

喜樹葉(果)粉碎→乙醇或堿水萃取→萃取液濃縮至浸膏→溶劑萃取→硅膠或大孔樹脂吸附分離→結(jié)晶得粗品→重結(jié)晶得產(chǎn)品。產(chǎn)品得率低于萬(wàn)分之四，這種方法存在產(chǎn)品收率低，耗費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)，成本高等問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種從馬比木中提取分離喜樹堿的方法。

本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

本發(fā)明的從馬比木中提取分離喜樹堿的方法的具體步驟如下：

(1)首先將馬比木粉碎成粉末，然后往馬比木粉末中加入乙醇，控制料液比為1:6-12，然后加熱，在60-80℃下回流提取0.5-3h，提取結(jié)束得到提取液；

(2)將步驟(1)得到的提取液過(guò)濾，回收乙醇，然后將提取液經(jīng)過(guò)大孔樹脂柱進(jìn)行分離，提取液與樹脂的重量比為3-7:1，上樣速度為2-6BV/h，然后選用乙醇作為解析液進(jìn)行解析，解析液流速為1-3BV/h，解析液體積為8-12BV，然后收集得到喜樹堿粗品；