[發(fā)明專利]一種冠突散囊菌的分生孢子的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410336273.3
• 申請(qǐng)日: 2014-07-15
• 公開（公告）號(hào): CN105255807B
• 公開（公告）日: 2018-09-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 彭超;熊強(qiáng);李凡;林海龍;賀文浩;王春玲
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中糧營(yíng)養(yǎng)健康研究院有限公司;中糧集團(tuán)有限公司
• 主分類號(hào): C12N3/00
• 分類號(hào): C12N3/00
• 代理公司: 北京潤(rùn)平知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11283
• 代理人: 金迪;李婉婉

本發(fā)明涉及一種冠突散囊菌的分生孢子的制備方法，該方法包括：(1)將冠突散囊菌株培養(yǎng)至產(chǎn)生菌絲但不產(chǎn)生孢子；(2)在高滲、高溫和高濕中至少一種條件下繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。采用本發(fā)明的方法能夠快速地制備純的冠突散囊菌的分生孢子，將其作為人工接種物應(yīng)用于茯磚茶的工業(yè)化生產(chǎn)，能夠提高茯磚茶產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種冠突散囊菌的分生孢子的制備方法。

背景技術(shù)

“金花菌”，即冠突散囊菌，是茯磚茶生產(chǎn)的優(yōu)勢(shì)菌，在茯磚茶上長(zhǎng)有大量金黃色顆粒，俗稱“金花”。“金花”是茯磚茶獨(dú)特風(fēng)味的主要影響因素，長(zhǎng)年飲用茯磚茶有調(diào)理腸胃、促進(jìn)消化、降血糖、降血脂、增強(qiáng)人體體質(zhì)及延緩衰老等功效，而這些功效與“金花菌”的作用是密不可分的。人們通常根據(jù)“金花菌”的質(zhì)量和數(shù)量來判斷茯磚茶品質(zhì)的好壞。齊祖同、溫瓊英等對(duì)茯磚茶優(yōu)勢(shì)菌進(jìn)行了培養(yǎng)鑒定，發(fā)現(xiàn)該優(yōu)勢(shì)菌最主要的特征是具冠狀突起及表面明顯粗糙具小疣的子囊孢子和具小刺的分生孢子，是產(chǎn)生有性型(子囊孢子階段)和無性型(分生孢子階段)孢子的全型真菌，并以子囊孢子和分生孢子為主要依據(jù)正式將該菌有性型鑒定為冠突散囊菌。

茯磚茶加工中的“發(fā)花”過程是形成茯磚茶獨(dú)特品質(zhì)的關(guān)鍵工藝，“發(fā)花”的實(shí)質(zhì)是通過控制一定的外界條件，促使微生物優(yōu)勢(shì)菌——冠突散囊菌(Eurotium cristatum)的生長(zhǎng)繁殖，產(chǎn)生金黃色的閉囊殼。由于冠突散囊菌等微生物的大量參與，形成了特有的菌花香，并由于這些微生物的作用以及在加工過程中的高溫高濕作用下，茶多酚的氧化、縮合，蛋白質(zhì)和纖維素等大分子的分解，氨基酸、糖類和咖啡堿等各成分之間的聚合、縮合等一系列的復(fù)雜反應(yīng)，形成了茯磚茶獨(dú)特的品質(zhì)特征。

目前，我國(guó)茯磚茶的生產(chǎn)幾乎都是靠自然接種發(fā)酵，行業(yè)內(nèi)對(duì)冠突散囊菌的生物學(xué)特性研究并不深入，對(duì)此菌的生長(zhǎng)發(fā)育特性了解不夠，發(fā)花條件掌握不好，冠突散囊菌無法在培養(yǎng)前期形成優(yōu)勢(shì)菌，會(huì)造成其他雜菌污染嚴(yán)重(比如黑曲霉、酵母和青霉菌等)，最終產(chǎn)品不能形成大量“金花”，造成產(chǎn)品質(zhì)量低劣，質(zhì)量不穩(wěn)定，不易銷售，甚至原料的極大浪費(fèi)，產(chǎn)量低，周期長(zhǎng)等不良現(xiàn)象，為此有必要進(jìn)行人工接種生產(chǎn)。

人工接種可避免雜菌污染，但需大量接種物(孢子)。劉作易等(1991年，茯磚茶金花菌生長(zhǎng)條件研究)研究結(jié)果表明，冠突散囊菌的子囊孢子和分生孢子的單孢子均能形成相似菌落，均能產(chǎn)生分生孢子和子囊孢子，孢子的有性型和無性型在特定條件下可以相互轉(zhuǎn)化，證明了該菌為同宗配合菌。當(dāng)分生孢子作為接種物時(shí)，其能夠大量快速積累且孢子質(zhì)量穩(wěn)定性也較好，所以選擇分生孢子作為接種物更加適合。

中國(guó)專利申請(qǐng)CN102120964A“冠突散囊菌孢子懸浮液制備方法”中公開了一種冠突散囊菌孢子懸浮液的制備方法，金花孢子顆粒均勻，短期內(nèi)能制備大量孢子懸浮液，用于茯磚茶的工業(yè)化生產(chǎn)。中國(guó)專利申請(qǐng)CN102965328A公開了一種金花菌孢子粉的制備方法，獲得的金花孢子粉既可以用于茯磚茶的工業(yè)化生產(chǎn)，也可以用于金花菌功能性成分的提取，縮短了茯磚茶生產(chǎn)周期，降低了發(fā)花失敗的風(fēng)險(xiǎn)。以上兩篇公開專利均是研究“金花”孢子，實(shí)質(zhì)上是冠突散囊菌的分生孢子和子囊孢子的混合物。

因此，亟待建立一種快速、大量積累純種分生孢子的培養(yǎng)方法，將其作為人工接種物應(yīng)用于茯磚茶的工業(yè)化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種快速、大量積累純種分生孢子的方法，以用分生孢子作為接種物，克服現(xiàn)有技術(shù)中冠突散囊菌的有性孢子遺傳不穩(wěn)定，進(jìn)而造成茯磚茶產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定的缺陷。

本發(fā)明的發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn)，將冠突散囊菌株培養(yǎng)至產(chǎn)生菌絲但不產(chǎn)生孢子，然后在高滲、高溫和高濕中至少一種條件下繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，即可實(shí)現(xiàn)快速、大量積累純種分生孢子的發(fā)明目的。

因此，為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種冠突散囊菌的分生孢子的制備方法，該方法包括：

(1)將冠突散囊菌株培養(yǎng)至產(chǎn)生菌絲但不產(chǎn)生孢子；

(2)在高滲、高溫和高濕中至少一種條件下繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。