[發明專利]大薯脫毒組培苗的培養方法

無效

• 申請號: 201410336067.2
• 申請日: 2014-07-16
• 公開（公告）號: CN104041419A
• 公開（公告）日: 2014-09-17
• 發明（設計）人: 王曉娟
• 申請（專利權）人: 無錫中農科生物育種技術研究院有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種大薯脫毒組培苗的培養方法，其特征在于：包括如下步驟：

(1)植物外植體的選擇及無菌處理：選擇大薯帶芽莖段為外植體，用水沖洗干凈，切取頂芽，頂芽用75％酒精消毒30～60秒，再用濃度為5％～10％次氯酸鈉溶液消毒6～10分鐘，消毒后，取出頂芽，無菌水沖洗3～5次，最后用無菌濾紙吸干無菌水，無菌條件下剝取莖尖；

(2)叢生芽誘導培養：將上述剝取的莖尖接種到叢生芽誘導培養基中誘導叢生芽，培養期為40天，得叢生芽；所述叢生芽誘導培養基的組份組成為：MS+BA?1.5～2.0mg/L+GA₃0.1～0.5mg/L+NAA?0.1～0.5mg/L+蔗糖20～30g/L+瓊脂4～6g/L；

(3)增殖培養：將上述誘導出的叢生芽接種到增殖培養基中進行繼代培養，30天繼代一次，連續轉接4次，培養期為120天；所述增殖培養基的組份組成為：MS+BA?2.0～3.0mg/L+NAA?0.2～0.5mg/L+蔗糖20～30g/L+瓊脂4～6g/L；

(4)壯苗培養：將上述增殖培養出的叢生芽切成單芽或者小叢芽，接種到壯苗培養基中，培養期為20天；所述壯苗培養基的組份組成為：MS+BA?0.5～1.0mg/L+IBA?0.1～0.6mg/L+蔗糖20～30g/L+瓊脂4～6g/L；

(5)生根培養：將上述壯苗培養后的開葉的小苗接種到生根培養基中，培養期為35天，即得大薯脫毒組培苗；所述生根培養基的組份組成為：1/2MS+IBA?0.1～0.5mg/L+蔗糖20～30g/L+瓊脂4～6g/L。

2.根據權利要求1所述的大薯脫毒組培苗的培養方法，其特征在于：所述步驟(1)中，用水清洗干凈的具體操作方式為：先用自來水沖洗干凈，再用蒸餾水沖洗。

3.根據權利要求1所述的大薯脫毒組培苗的培養方法，其特征在于：所述步驟(2)～(5)中，培養的條件為：培養溫度23～27℃，光照時間10～16小時/天，光照強度2000～3000lx。

4.根據權利要求1所述的大薯脫毒組培苗的培養方法，其特征在于：所述步驟(2)中，叢生芽誘導培養基的組份組成優選為：MS+BA?2.0mg/L+GA₃?0.1mg/L+NAA?0.5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L，pH值為5.5～5.8。

5.根據權利要求1所述的大薯脫毒組培苗的培養方法，其特征在于：所述步驟(3)中，增殖培養基的組份組成優選為：MS+BA?2.5mg/L+NAA?0.5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L，pH值為5.5～5.8。

6.根據權利要求1所述的大薯脫毒組培苗的培養方法，其特征在于：所述步驟(4)中，壯苗培養基的組份組成優選為：MS+BA?0.5mg/L+IBA?0.5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L，pH值為5.5～5.8。

7.根據權利要求1所述的大薯脫毒組培苗的培養方法，其特征在于：所述步驟(5)中，生根培養基的組份組成優選為：1/2MS+IBA?0.1mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L，pH值為5.5～5.8。