[發明專利]一種懸浮培養BHK-21細胞的無血清無動物源培養基及其配制方法

有效

• 申請號: 201410335070.2
• 申請日: 2014-07-15
• 公開（公告）號: CN105018416B
• 公開（公告）日: 2018-11-30
• 發明（設計）人: 趙峻嶺
• 申請（專利權）人: 內蒙古金源康生物工程有限公司
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071
• 代理公司: 北京中海智圣知識產權代理有限公司 11282
• 代理人: 李大為

1.一種懸浮培養BHK-21細胞的無血清無動物源培養基，其特征在于：包括氨基酸，無機鹽，維生素，蛋白水解物，脂類和添加物；

所述氨基酸包括L-丙氨酸、L-谷氨酰胺、L-精氨酸鹽酸鹽、L-天冬氨酸、L-天冬酰胺、L-半胱氨酸一水合物、L-谷氨酸、L-異亮氨酸、L-亮氨酸、L-賴氨酸鹽酸鹽、L-蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸、L-蘇氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸二鈉鹽、L-纈氨酸、L-胱氨酸鹽酸鹽、L-組氨酸鹽酸鹽、L-賴氨酸和甘氨酸；

所述無機鹽包括無水氯化鈣、氯化鈉、磷酸氫二鈉、六水氯化鎂、無水硫酸鎂、氯化鉀、一水磷酸二氫鈉、七水合硫酸鋅、九水合硝酸鐵、亞硒酸鈉、五水硫酸銅和硫酸亞鐵；

所述維生素包括生物素、氯化膽堿、D-泛酸鈣、葉酸、煙酰胺、鹽酸吡哆醇、磷酸吡哆醛、核黃素、鈷胺素、鹽酸硫胺素和肌醇；

所述蛋白水解物包括酵母超濾物、棉籽水解物、大米水解物和麥麩水解物；

所述脂類包括亞油酸、大豆卵磷脂、膽固醇、腐胺和乙醇胺；

所述添加物包括D-葡萄糖、丙酮酸鈉、硫辛酸、胸苷、腺嘌呤、胸腺嚓咤、重組胰島素、檸檬酸鐵、環庚三烯酚酮、酚紅鈉鹽、F-68、碳酸氫鈉、還原型谷胱甘肽和次黃嘌呤鈉鹽；

其中所述培養基中各種原料物質的含量分別為：

(1)氨基酸：

L-丙氨酸100-180mg/L，

L-谷氨酰胺200-300mg/L，

L-精氨酸鹽酸鹽200-300mg/L，

L-天冬氨酸100-150mg/L，

L-天冬酰胺300-450mg/L，

L-半胱氨酸一水合物10-50mg/L，

L-谷氨酸50-150mg/L，

L-異亮氨酸100-300mg/L，

L-亮氨酸100-150mg/L，

L-賴氨酸鹽酸鹽100-350mg/L，

L-蛋氨酸35-90mg/L，

L-苯丙氨酸10-60mg/L，

L-脯氨酸80-155mg/L，

L-絲氨酸100-200mg/L，

L-蘇氨酸150-250mg/L，

L-色氨酸100-150mg/L，

L-酪氨酸二鈉鹽30-100mg/L，

L-纈氨酸100-185mg/L，

L-胱氨酸鹽酸鹽50-85mg/L，

L-組氨酸鹽酸鹽50-150mg/L，

L-賴氨酸50-500mg/L，

甘氨酸50-90mg/L，

(2)無機鹽:

無水氯化鈣100-150mg/L，

氯化鈉5000-7500mg/L，

磷酸氫二鈉10-45mg/L，

六水氯化鎂50-80mg/L，

無水硫酸鎂2-65mg/L，

氯化鉀40-350mg/L，

一水磷酸二氫鈉20-50mg/L，

七水合硫酸鋅0.1-0.7mg/L，

九水合硝酸鐵0.01-0.6mg/L，

亞硒酸鈉0.01-0.03mg/L，

五水硫酸銅0.0001-0.003mg/L，

硫酸亞鐵0.01-0.2mg/L

(3)維生素：

生物素0.005-0.01mg/L，

維生素C1-12mg/L，

氯化膽堿0.5-5mg/L，

D-泛酸鈣0.2-2mg/L，

葉酸0.2-5mg/L，

煙酰胺5-8mg/L，

鹽酸吡哆醇5-8mg/L，

磷酸吡哆醛0.06-0.3mg/L，

核黃素0.08-0.6mg/L，

鈷胺素0.04-3mg/L，

鹽酸硫胺素0.05-0.5mg/L，

肌醇5-8mg/L，

(4)脂類添加：

亞油酸0.1-0.3mg/L，

大豆卵磷脂15-20mg/L，

膽固醇6-10mg/L，

腐胺0.04-0.8mg/L，

乙醇胺1-30mg/L，

(5)水解物：

棉籽水解物500-4000mg/L，

酵母超濾物500-4000mg/L，

大米水解物500-2000mg/L，

麥麩水解物500-4000mg/L，

(6)其余添加物：

D-葡萄糖3000-6000mg/L，

丙酮酸鈉100-250mg/L，

硫辛酸0.05-0.6mg/L，

胸苷0.06-0.5mg/L，

腺嘌呤0.1-5mg/L，

胸腺嘧啶0.02-2mg/L，

重組胰島素3-25mg/L，

檸檬酸鐵0.02-1mg/L，

環庚三烯酚酮0.1-8mg/L，

酚紅鈉鹽6-15mg/L，

F-6850-600mg/L，

碳酸氫鈉1200-2200mg/L，

還原型谷胱甘肽0.01-0.9mg/L，

次黃嘌呤鈉鹽0.1-5mg/L。