[發(fā)明專利]一種鑒定大豆細(xì)胞核雄性不育系的分子標(biāo)記及其鑒定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410328901.3
• 申請(qǐng)日: 2014-07-10
• 公開（公告）號(hào): CN104131012B
• 公開（公告）日: 2017-02-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王曉波;邱麗娟;李冬冬;馬元山;張浩偉;高雅麗;張文明
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/29
• 分類號(hào): C12N15/29;C12Q1/68
• 代理公司: 安徽匯樸律師事務(wù)所34116
• 代理人: 汪蕙

1.一種鑒定大豆細(xì)胞核雄性不育系的分子標(biāo)記，其特征在于，所述分子標(biāo)記具有如SEQ?ID?NO：1所示的核苷酸序列。

2.一種利用如權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記鑒定大豆細(xì)胞核雄性不育系的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)提取大豆植物組織基因組DNA，以所述分子標(biāo)記的核苷酸序列為模板設(shè)計(jì)引物，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲得擴(kuò)增片段；

(2)若上述步驟(1)中能夠獲得所述分子標(biāo)記的核苷酸序列，則上述步驟(1)的大豆為細(xì)胞核雄性不育系大豆；若不能，則為細(xì)胞核雄性可育系大豆。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用分子標(biāo)記鑒定大豆細(xì)胞核雄性不育系的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，引物的核苷酸序列為：

上游引物：SEQ?ID?NO：2：5’GTTAGGTGGGTAGGTGAG3’；

下游引物：SEQ?ID?NO：3：5’ACATAGTGTCGGAGTGG3’；

所述步驟(2)中，若能夠獲得長(zhǎng)度為1239bp的擴(kuò)增片段，則所述大豆為雄性不育系大豆，若不能獲得長(zhǎng)度為1239bp的擴(kuò)增片段，則為雄性可育系大豆。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用分子標(biāo)記鑒定大豆細(xì)胞核雄性不育系的方法，其特征在于，所述步驟(1)的PCR擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃預(yù)變性5min，95℃變性30s，起始退火溫度58℃，以后每循環(huán)降低0.3℃，退火時(shí)間為40s，72℃延伸90s，設(shè)38個(gè)循環(huán)，最后72℃繼續(xù)延伸15min。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用分子標(biāo)記鑒定大豆細(xì)胞核雄性不育系的方法，其特征在于，所述步驟(1)的大豆植物組織選自葉片、根尖、種子和種皮中的一種。