[發明專利]一種熒光探針及其制備方法和應用有效
| 申請號： | 201410328648.1 | 申請日： | 2014-07-10 |
| 公開（公告）號： | CN104151301A | 公開（公告）日： | 2014-11-19 |
| 發明（設計）人： | 黃志紓;譚嘉恒;吳偉彬;陳碩斌;胡命豪 | 申請（專利權）人： | 中山大學 |
| 主分類號： | C07D405/04 | 分類號： | C07D405/04;G01N21/64 |
| 代理公司： | 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102 | 代理人： | 任重 |
| 地址： | 510006 廣東省*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 熒光 探針 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種熒光探針，其特征在于結構式為：
式中R1選自F或N-甲基哌嗪基，R2選自N-甲基哌嗪基。
2.一種如權利要求1所述的熒光探針的制備方法，其特征在于包括以下步驟：
先用4-二乙胺基水楊醛與丙二酸二乙酯反應，得到化合物再將在POCl3的存在下與DMF反應，得到醛基香豆素中間體將溶于DMSO中，加入的N-甲基哌嗪和K2CO3，反應生成將與醛基香豆素中間體反應，得到最終探針化合物。
3.如權利要求1所述的熒光探針在檢測G-四鏈體結構中的應用。
4.一種檢測G-四鏈體結構的方法，其特征在于，包括如下步驟：
1)將待測DNA溶于PH值7.2-7.4的緩沖液，得到溶液A；將所述探針溶解，再用PH值7.2-7.4的緩沖液稀釋，得到溶液B；
2)將溶液A和溶液B混合，使混合液中待測DNA與探針的摩爾比為1～10，混合后對混合液進行熒光光譜分析，或者在紫外燈下進行肉眼觀察，判斷待測DNA是否為正平行構象的G-四鏈體結構；判斷方法如下：
(a)在紫外燈下進行肉眼觀察時，與溶液B對比，若混合液在紫外燈下通過肉眼觀察到熒光增強，則待測DNA為正平行構象的G-四鏈體結構；
(b)對混合液進行熒光光譜分析時，與溶液B相比，若混合液的熒光發射強度增強，則待測DNA為正平行構象的G-四鏈體結構。
5.如權利要求4所述的應用，其特征在于，判斷方法(b)中，與溶液B相比，若混合液的熒光發射強度增強30～200倍，則待測DNA為正平行構象的G-四鏈體結構。
6.如權利要求4或5所述的應用，其特征在于，所述緩沖液為Tris-鹽酸緩沖液。
7.如權利要求4或5所述的應用，其特征在于，所述探針用二甲基亞砜溶解。
8.如權利要求4或5所述的應用，其特征在于，溶液A和溶液B的混合反應時間為1分鐘。
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