[發明專利]一種誘導楸樹體細胞胚發生的方法有效
| 申請號: | 201410327692.0 | 申請日: | 2014-07-08 |
| 公開(公告)號: | CN104041418A | 公開(公告)日: | 2014-09-17 |
| 發明(設計)人: | 王鵬;楊如同;李亞;馬玲玲;汪慶;李林芳 | 申請(專利權)人: | 江蘇省中國科學院植物研究所 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 211225 江蘇省南京市溧水區*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 誘導 體細胞 發生 方法 | ||
1.一種誘導楸樹體細胞胚發生的方法,包括下列步驟:
(1)楸樹成熟種子處理
將楸樹成熟的種子用紗布包好后用自來水沖洗30min,接著75%酒精表面滅菌60s,無菌水沖洗2次后用0.1%氯化汞溶液滅菌12min,無菌水沖洗6次。接種時剪開紗布,將種子兩端邊緣種皮略微剪破接種。(2)愈傷組織誘導
將處理過的楸樹種子平鋪于誘導愈傷的培養基上,培養基放置于溫度25~28℃,無光照的培養室中暗培養20d后獲得愈傷組織。
(3)愈傷組織的繼代增殖培養
將愈傷組織放置在相同的誘導愈傷的培養基上,在光強為1500lux,光照時間是12h/d,溫度25~28℃培養室中培養10d。
(4)體細胞胚的誘導
選擇活力高的愈傷組織將其切成合適的小塊后放置于誘導體細胞胚的培養基上,在光強為1500lux,光照時間是12h/d,溫度25~28℃培養室中誘導楸樹體細胞胚發生。
2.如權利要求1(2)中所述的誘導愈傷的培養基,其特征是1/2MS+0.3-0.5mg·L玉米素+0.3~0.9mg·L吲哚乙酸。KT為激動素。
3.如權利要求1(4)中所述的活力高的愈傷組織,其特征是淺黃色、緊致、表面上呈顆粒狀的愈傷組織。
4.如權利要求1(4)中所述的誘導體細胞胚的培養基,其特征是MS+0.5-3.0mg·L激動素+0.05mg·L吲哚乙酸。
5.如權利要求1(4)中所述合適的小塊,其特征是愈傷大小為0.5×0.5×0.5cm。
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