[發明專利]一種半乳糖配體分子的酶促合成方法

在審

• 申請號: 201410327610.2
• 申請日: 2014-07-10
• 公開（公告）號: CN104293859A
• 公開（公告）日: 2015-01-21
• 發明（設計）人: 程怡;高幼衡;聶華;鄭品勁
• 申請（專利權）人: 程怡
• 主分類號: C12P19/14
• 分類號: C12P19/14
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，具體是涉及一種小分子量半乳糖配體，其酶促合成法及利用該半乳糖配體制備的肝靶向脂質體及肝靶向藥物。

背景技術

在新藥研發中，如何讓活性成分有效地靶向到目標細胞或組織中是重要的研究課題之一。例如，不論某藥物的藥理作用如何好，如果不能到達需治療的組織，如病灶部位，也不能達到期望的藥理效果。除了局部給藥方法外，通常，活性藥物成分(藥物)，需要經過口服或注射的方式給藥，藥物經血液運輸達到作用部位后發揮其藥理作用。如果藥物不能有效到達治療組織，就需要加大藥物的給藥劑量，但藥物的副作用隨之增加。為了提高藥物在靶點部位的聚集，需要供助載體、配體或抗體將藥物通過胃腸道、或全身血液循環而選擇性地濃集定位于靶組織、靶器官、靶細胞或細胞內結構，我們稱這種定向的給藥方式為靶向給藥系統。

去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)是位于肝實質細胞表面的內吞性受體，可專一識別未端帶有非還原性半乳糖殘基的糖蛋白或小分子化合物。由于ASGPR是肝實質細胞特有受體，專一存在于肝實質細胞表面，因此ASGPR成為肝臟定向轉移的最佳受體，為肝癌的治療、肝臟基因的定向表達和肝功能檢測提供了良好的研究途徑。利用ASGPR的特性，可設計一種含半乳糖配基的小分子化合物，將其共價偶聯于脂質體表面得到肝臟靶向脂質體，用于裝載藥物發揮導向作用，選擇性提高肝實質細胞內的藥物濃度、延長作用于肝部位藥物的時效、同時減少給藥劑量、降低藥物毒性，提高藥物的治療指數。

其中可被ASGPR專一性識別的未端帶有非還原性半乳糖殘基的糖蛋白或小分子化合物，我們稱之為半乳糖配體。目前半乳糖配體分子的合成多采用化學合成法。化學合成法工藝較復雜，合成步驟多，產率較低，所用試劑多含有一定毒性。例如，Shao-ning等(Wang?S?N,Deng?Y?H,Xu?H,et?al.Synthesis?of?a?novel?galactosylated?lipid?and?its?application?to?the?hepatocyte-selective?targeting?of?liposomal?doxorubicin[J].Eur?J?Pharm?Biopharm,2006,62(1)：32-38.)用膽固醇、乳糖酸鈣、乙二胺、琥珀酸酐等為原料，分三步合成目標產物：第一步將乳糖酸脫水形成內酯，然后與乙二胺酰化生成1-N-[O-β-D-Galactopyranosyl-(1,4)-D-Gluconamide]-2-N`-methylamine(LA-ED)；第二步膽固醇、琥珀酸酐和N-羥基琥珀酰亞胺生成N-Hydroxysuccinimidly5-Cholesten-3-yloxy?Succinate(CHS-NHS)；第三步LA-ED與CHS-NHS生成目標產物(5-Cholesten-3-yl)4-oxo-4-[2-(lactobionyl?amido)ethylamido]butanoate(CHS-ED-LA),如果以乳糖酸鈣為起始原料計算收率，最終得率為10.8％，前述反應過程可參見下文所列反應式：

又比如，Leo等(Sliedregt?L?A,Rensen?P?C,Rump?E?T,et?al.Design?and?synthesis?of?novel?amphiphilic?dendritic?galactosides?for?selective?targeting?of?liposomes?to?the?hepatic?asialoglycoprotein?receptor[J].J?Med?Chem,1999,42(4)：609-618.)用化學法合成一種帶三個半乳糖單元配體分子，合成步驟達6步之多，最終收率約為0.1％，這種合成效率遠不能滿足實際生產需求。

總結以往公開有關半乳糖配體分子的制備方法，尚存在以下不足：

1、文獻中記錄的半乳糖配體分子的制備方法都是采用化學法，所用試劑和反應介質多有毒性，而且反應后很難除盡，產品很難滿足注射制劑的質量要求。

2、化學合成法步驟較多，而且副產物多，產品純化困難，只能滿足實驗室少量制備要求，不適用工業化生產。

3、合成產率低，目前采用化學合成法最高得率僅為10％左右。

4、化學合成法所用的試劑和反應所產生的副產物一般很難回收再利用，對環境造成一定的污染。