[發明專利]一種半乳糖配體分子的酶促合成方法在審
| 申請號： | 201410327610.2 | 申請日： | 2014-07-10 |
| 公開（公告）號： | CN104293859A | 公開（公告）日： | 2015-01-21 |
| 發明（設計）人： | 程怡;高幼衡;聶華;鄭品勁 | 申請（專利權）人： | 程怡 |
| 主分類號： | C12P19/14 | 分類號： | C12P19/14 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 510006 廣東省廣州市*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 半乳糖 分子 合成 方法 | ||
1.一種半乳糖配體分子的合成方法，其特征在于：所述方法是在酶的催化條件下，酯化而合成，具體包括以下步驟：
步驟1：固醇基連接碳橋步驟：將一定量的二乙烯酯、固醇ROH在脫水有機溶劑中溶解后，加入適量酶催化劑，溫度35℃～55℃，反應0～48h后，過濾，濾液濃縮揮去有機溶劑，濃縮液重結晶即得中間產物式II；反應表示為：
其中n＝0～99；
其中ROH為固醇，R為固醇基，R選自以下5種基團的至少一種：
其中，固醇與二乙烯酯的投料摩爾比為1∶1～20∶1；
其中，所述的脫水有機溶劑為異辛烷、正己烷、環己烷、石油醚、丙酮其中至少一種或任意幾種的組合；
其中所采用的酶催化劑為選自RCL、Chirazyme?L-2脂肪酶、Chirazyme?L一1脂肪酶及Lipase?QLM中的一種；
步驟2：半乳糖基連接碳橋步驟：將步驟1得到的中間產物式II與乳糖醇或半乳糖或乳糖R’OH在脫水有機溶劑中溶解后，加入適量的另一種酶催化劑和適量的分子篩，置于恒溫20～60℃，反應0.5～48h，抽濾，濾液真空低溫濃縮揮去有機溶劑，濃縮液層析純化，得到半乳糖配體分子式I，上述反應過程表示如下：
其中R’OH為乳糖醇、半乳糖或乳糖，R’為半乳糖基，反應位點為C-6位，R’選自以下結構中的一種：
其中，步驟1得到的中間產物式II與R’OH的投料摩爾比為1∶1～20∶1；
其中，所選的為南極假絲酵母脂肪酶B，或者其商品化固定酶Novozym435；
其中，所用反應溶劑選自吡啶、吡啶+丙酮、吡啶+THF、吡啶+叔戊醇、吡啶+乙二醇二甲醚、吡啶+DMF及吡啶+DMSO中的一種。
2.根據權利要求1所述的半乳糖配體分子的合成方法，其特征在于：所述的步驟1與步驟2的順序能夠互相顛倒。
3.根據權利要求1或2所述的半乳糖配體分子的合成方法，其特征在于：步驟2所采用的脫水有機溶劑為丙酮+吡啶，按照丙酮∶吡啶1∶1～1∶10的混合而組成。
4.根據權利要求1或2所述的半乳糖配體分子的合成方法，其特征在于：步驟1的固醇ROH與二乙烯酯的投料摩爾比為5∶1～10∶1，步驟1酶的用量為1～20mg/mL反應體系。
5.根據權利要求1或2所述的半乳糖配體分子的合成方法，其特征在于：在步驟2中，中間產物式II與乳糖或半乳糖或乳糖醇R’OH的投料摩爾比為3∶1～10∶1，步驟2酶的用量為：1～50mg/mL反應體系。
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