[發明專利]整合素阻斷劑多肽及其制備方法和用途

在審

• 申請號: 201410324306.2
• 申請日: 2014-07-08
• 公開（公告）號: CN104059132A
• 公開（公告）日: 2014-09-24
• 發明（設計）人: 康夢實;張力君
• 申請（專利權）人: 南京安吉生物科技有限公司
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K7/06;C07K1/16;C07K1/06;C07K1/04;A61P19/02;A61P9/10;A61P27/02;A61P35/00
• 代理公司: 南京知識律師事務所 32207
• 代理人: 蔣海軍

1.整合素阻斷劑多肽，其所述的多肽的氨基酸序列為下列中的一種：

多肽Ⅰ Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp；

多肽Ⅱ Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp；

多肽Ⅲ Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp；

多肽Ⅳ Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp；

多肽Ⅴ Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp；

多肽Ⅵ Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp；

多肽Ⅶ Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp；

多肽Ⅷ Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp；

多肽Ⅸ Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp；

多肽Ⅹ Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp。

2.權利要求1所述的整合素阻斷劑多肽的制備方法，其特征在于：所述多肽采用固相合成方法合成，所述固相合成方法是其以wang resin為起始原料，然后用保護氨基酸依次接一肽至八、九、十至十七肽，接肽工作完成后充分洗滌，然后切肽、后處理即得多肽粗品，將粗品進行純化，首先溶解，然后用制備型高效液相經過兩次純化，最后濃縮凍干得到純品。

3.根據權利要求2所述的整合素阻斷劑多肽，其特征在于：所述固相合成方法制得的多肽純度均大于95％。

4.根據權利要求1所述的整合素阻斷劑多肽在制備治療關節炎、抑制新生血管眼部疾病、抑制腫瘤細胞增值或抑制內皮細胞遷移的活性藥物中的用途。

5.根據權利要求4所述的整合素阻斷劑多肽的用途，其特征在于：所述整合素阻斷劑多肽在佐劑誘導大鼠關節炎動物模型能發揮體內免疫保護作用，對AA大鼠關節炎具有治療作用。

6.根據權利要求4所述的整合素阻斷劑多肽的用途，其特征在于所述抑制新生血管的作用為對角膜新生血管的抑制作用；對虹膜新生血管的抑制作用；對脈絡膜新生血管的抑制作用。

7.根據權利要求4所述的整合素阻斷劑多肽的用途，其特征在于所述對角膜抑制新生血管的作用，多肽Ⅰ、多肽Ⅱ和多肽Ⅲ整合素阻斷劑均能夠極顯著抑制角膜新生血管的生長，多肽Ⅳ、多肽Ⅴ和多肽Ⅵ整合素阻斷劑能夠顯著的抑制角膜新生血管的生長；對虹膜新生血管的抑制作用，多肽Ⅰ—多肽Ⅹ能夠抑制新生血管形成并使已形成的血管退化，其中多肽Ⅰ—多肽Ⅲ與陰性組相比新生血管的消退很明顯，治療效果優于多肽Ⅳ—多肽Ⅹ；多肽Ⅰ—多肽Ⅶ能夠有效的治療脈絡膜新生血管。

8.根據權利要求4所述的整合素阻斷劑多肽的用途，其特征在于多種腫瘤細胞增值的抑制為對胃癌、肺癌、肝癌、乳腺癌、結腸癌、膠質瘤、黑色素瘤和宮頸癌、前列腺癌、結直腸癌、卵巢癌、鼻咽癌增殖具有抑制作用。

9.根據權利要求4所述的整合素阻斷劑多肽的用途，其特征在于：所述內皮細胞為人臍靜脈內皮細胞，所述人臍靜脈內皮細胞用含5％胎牛血清和1×ECGS的內皮細胞培養液；多肽Ⅰ、多肽Ⅱ、多肽Ⅲ能抑制5％的胎牛血清及ECGS誘導的HUVEC的遷移作用，抑制率均大于68.10％，對細胞遷移的抑制率與陰性對照相比有極顯著性的差異(P<0.01)；在多肽Ⅳ、多肽Ⅴ、多肽Ⅵ的作用下，遷移的內皮細胞數與陰性對照相比減少，抑制率均大于60.57％，對細胞遷移的抑制率與陰性對照相比有顯著性的差異(P<0.05)。