[發(fā)明專利]基于固體發(fā)酵的青稞中多糖含量的提高方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201410318845.5
• 申請日: 2014-07-04
• 公開（公告）號: CN104087633A
• 公開（公告）日: 2014-10-08
• 發(fā)明（設計）人: 汪新;周選圍
• 申請（專利權）人: 西藏圣龍實業(yè)有限公司
• 主分類號: C12P19/14
• 分類號: C12P19/14;C12P19/04;C12R1/645
• 代理公司: 上海交達專利事務所 31201
• 代理人: 王毓理;王錫麟

1.一種基于固體發(fā)酵的青稞多糖含量的提高方法，其特征在于，通過將經(jīng)過清洗浸泡后滅菌處理的青稞籽粒接入靈芝(Ganoderma?lucidum)液體菌種并固體發(fā)酵得到青稞發(fā)酵基質；然后將青稞發(fā)酵基質干燥、粉碎后經(jīng)乙醇提取得到的沉淀物即為多糖；

所述的清洗浸泡是指：浸泡溫度為30℃～40℃，固體發(fā)酵溫度為28℃～30℃。

2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征是，所述的固體發(fā)酵包括：

①接種，是指在無菌條件下，將靈芝液體菌種按照5％‐10％的量(v/v)接入已經(jīng)滅菌的青稞籽粒中；

②培養(yǎng)，是指溫度為25‐30℃，相對濕度為85‐95％的環(huán)境下培養(yǎng)8～10d。

3.根據(jù)權利要求1或2所述的方法，其特征是，所述的清洗浸泡是指：當浸泡溫度為30℃時，固體發(fā)酵溫度為28℃；當浸泡溫度為40℃時，固體發(fā)酵溫度為30℃。

4.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征是，所述的靈芝液體菌種是指：經(jīng)過復壯、液體培養(yǎng)后獲得的懸浮在培養(yǎng)液中的靈芝菌絲體和培養(yǎng)液的復合體。

5.根據(jù)權利要求4所述的方法，其特征是，所述的復壯是指：由試管斜面或培養(yǎng)皿平板固體培養(yǎng)基上的靈芝菌絲接至PDA固體培養(yǎng)基平板上，28℃恒溫培養(yǎng)7d。

6.根據(jù)權利要求5所述的方法，其特征是，所述的PDA固體培養(yǎng)基通過以下方式配制得到：去皮馬鈴薯200g用700～800mL蒸餾水煮30～40min至爛，用4層紗布過濾后溶入葡萄糖20g、KH2PO45g、MgSO4·7H2O3g、Vitamin?B10.01g，定容至1000mL，調pH值至6.5‐7.0，加入瓊脂粉16～18g，121℃、1.034×105Pa、20min高壓滅菌，冷至60℃時倒平板，4℃保存。

7.根據(jù)權利要求4所述的方法，其特征是，所述的液體培養(yǎng)是指：用接種鏟將平板菌種接至裝有20～40mL液體靈芝預培養(yǎng)培養(yǎng)基的150mL三角瓶中搗碎，靜置2～3d活化后，將三角瓶放入28℃恒溫振蕩器中120rpm培養(yǎng)4～6d。

8.根據(jù)權利要求7所述的方法，其特征是，所述的靈芝預培養(yǎng)培養(yǎng)基通過以下方式配置得到：稱取蔗糖35g、蛋白胨5g、酵母粉25g、KH₂PO₄·H₂O1g、MgSO₄·7H₂O0.5g、VitaminB₁0.05g于燒杯中，加入800mL去離子水，充分攪拌溶解，再補水至1000mL；調pH值到5.5，121℃、1.034×10⁵Pa、20min高壓滅菌，4℃保藏。

9.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征是，所述的干燥包括：

①把發(fā)酵后的青稞基質放入風速2.5～4m/s、風溫50～55℃的電熱鼓風干燥裝置中干燥3～4.5小時；

②把經(jīng)過上述①處理的青稞基質放入微波爐干燥和殺菌裝置中，微波干燥和殺菌裝置的干燥功率為0.2～0.3W/g，頻率為2450±50MHz，鋪放厚度1.5～2.5cm，風速40～45m/min，干燥和殺菌的時間為20～30min。

10.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征是，所述的乙醇提取包括以下步驟：

①粉碎后的青稞發(fā)酵基質用75％(v/v)乙醇，60℃水浴1h；

②去脂后的殘渣加10倍量的清水浸泡1小時后，加熱至微沸浸提，溫度90～100℃，保持60～90min；

③渣濾進行第二次浸提；再過濾，濾渣進行第三次浸提；合并三次浸提液；

④減壓濃縮，55℃旋轉蒸發(fā)，濾液濃度相當于原浸提液1/3～1/5體積時，進入乙醇沉淀環(huán)節(jié)；

⑤在攪拌狀態(tài)下，以流速為每min1/10水提物的體積下加入2倍量體積的95％以上(v/v)乙醇，并置于冷凍環(huán)境下過夜；

⑥采用8000轉離心分離或靜置2小時后過濾分離，所得濾渣即為提取的粗多糖。