[發明專利]一種評價轉基因棉花對大草蛉影響的生物測定方法

有效

• 申請號: 201410318625.2
• 申請日: 2014-07-04
• 公開（公告）號: CN104133054A
• 公開（公告）日: 2014-11-05
• 發明（設計）人: 王英麗;梁革梅;魏紀珍;袁向東;趙曼
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院植物保護研究所
• 主分類號: G01N33/48
• 分類號: G01N33/48
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

技術領域

本發明涉及植物保護技術領域，具體地說，涉及一種利用Bt抗性棉鈴蟲評價轉基因棉花對大草蛉生長發育影響的生物測定方法。

背景技術

大草蛉Chrysopa?pallens屬于昆蟲綱，脈翅目，草蛉科。它是許多作物生態系統中普遍存在的、資源豐富的天敵，其幼蟲和成蟲都是捕食性的，可以取食蚜蟲、葉螨、鱗翅目的卵和低齡幼蟲等，捕食范圍廣泛。早期人們評價轉基因植物對草蛉的影響結果表明轉基因植物對草蛉沒有不良影響，如Li等的研究發現，普通草蛉取食表達Cry1Ab或Cry3Bb1的玉米花粉后，其存活率、產卵前期、生殖力、產卵量及成蟲干重與取食非轉基因玉米花粉的草蛉沒有顯著差異(Li&Romeis,2010)；雒珺瑜等發現和常規棉花相比，飼喂取食轉雙價抗蟲棉(表達Cry1Ac和Cry2Ab蛋白)和單價抗蟲棉(表達Cry1Ac蛋白)的棉鈴蟲初孵幼蟲，使中華草蛉Chrysoperla?sinica?Tjeder的生長發育時間延長，但差異未達到顯著水平(雒珺瑜等，2011)。但Hilbeck等的室內非選擇性生測結果卻表明普通草蛉Chrysopa?carnea幼蟲在捕食Bt玉米上的歐洲玉米螟Ostrinia?nubilalis和埃及棉夜蛾Spodoptera?littoralis后，其死亡率高于對照；用加入CrylAb蛋白的人工飼料飼喂草蛉幼蟲，其死亡率仍然高于對照；但該報道之后的一系列試驗證明Cry1Ab對普通草蛉幼蟲沒有直接毒性(Hilbeck?et?al.,1998)。Romeis等認為以Bt敏感的昆蟲作為獵物對捕食性天敵的不利影響是因為Bt毒素造成獵物營養質量下降，進而間接影響了捕食性天敵的生長發育，并不是Bt本身對天敵的毒性造成的(Romeis?et?al.,2004)。Yu等也認為當前使用的抗蟲轉基因作物作用范圍較窄，對非靶標生物沒有直接的不利影響，而且提高了一些有益昆蟲的豐度和對害蟲的自然控制作用(Yu?et?al.,2011)。

2003年，孟山都公司通過雜交在Bollgard(轉基因抗蟲保鈴棉)基礎上轉入一個新的Cry2Ab基因，開發出表達Cry1Ac和Cry2Ab兩種不同殺蟲蛋白的BollgardⅡ。這個轉基因棉花品種，在美國、澳大利亞、南非、墨西哥和菲律賓等國家已開始商業化種植。所以研究這個品種對非靶標昆蟲的影響具有重要意義。

大草蛉能夠捕食取食轉基因棉葉的棉鈴蟲Helicoverpa?armigera、棉蚜Aphis?gossypii?Glover等，利用食物營養關系研究轉雙價抗蟲棉花中表達蛋白Cry1Ac和Cry2Ab對大草蛉的影響至關重要。利用抗性棉鈴蟲建立評價體系，使取食轉基因棉花的棉鈴蟲體內含有更多Bt蛋白，可以傳遞更多的蛋白到捕食棉鈴蟲的大草蛉體內，更有利于評價高劑量Bt對大草蛉的影響；而且由于棉葉的保鮮問題使棉鈴蟲的存活率較低，因此建立適用于“轉基因新鮮棉葉-抗性棉鈴蟲-大草蛉”評價體系的生物測定方法，是準確評價轉基因棉花對大草蛉影響的關鍵，結果將為轉基因作物的安全性評價奠定基礎。

Li?Y,Romeis?J.Bt?maize?expressing?Cry3Bb1does?not?harm?the?spider?mite,Tetranychus?urticae,or?its?ladybird?beetle?predator,Stethorus?punctillum.Biological?Control,2010,53(3):337-344。

雒珺瑜，崔金杰，辛惠江.轉Cry1Ac+Cry2Ab基因棉花對天敵生長發育的影響.中國棉花研究報告,2011,38(12):11-36。

Hilbeck?A,Baumgartner?M,Fried?P?M,et?al.Effects?of?transgenic?Bacillus?thuringiensis?corn-fed?prey?on?mortality?and?development?time?of?immature?Chrysoperla?cornea(Neuroptera:Chrysopidae)。Environmental?entomology,1998,27(2):480-487。