[發明專利]一種海洋中石油烴濃度的檢測方法

有效

• 申請號: 201410318328.8
• 申請日: 2014-07-04
• 公開（公告）號: CN104120179A
• 公開（公告）日: 2014-10-29
• 發明（設計）人: 葉文婷;劉博;劉永清;謝路順;鐘得喜
• 申請（專利權）人: 深圳市格瑞斯特環保技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 劉先珍

1.一種海洋中石油烴濃度的檢測方法，其特征在于：包括以下步驟：

1）將健康的可口革囊星蟲分別與添加有不同已知濃度的石油烴和待測樣品的培養液共培養一定時間；

檢測不同培訓條件下可口革囊星蟲的體腔液細胞DNA損傷狀況，根據已知石油烴的濃度確定DNA損傷狀況與石油烴濃度之間的數值關系；?????2）根據確定的數值關系計算待檢樣品中石油烴的濃度。

2.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于：所述數值關系使用繪制標準曲線的方式來確定。

3.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于：所述培養液的配置步驟為：將原油和經過濾滅菌后的天然海水按比例混合，接著超聲分散后靜置，吸取下層水相作為母液，將母液冷凍保存，用石油烴母液加一定量的海水配制等體積的若干個梯度濃度的石油烴溶液，隨后加等量的同一批海泥混勻。

4.根據權利要求3所述的檢測方法，其特征在于：所述原油和經過濾滅菌后的天然海水的比例為1:10—1:8，所述超聲分散時間為1h—1.5h，靜置時間為4—5h，冷凍溫度為3℃—4℃，所述梯度濃度個數為6—8個。

5.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于：所述培養方法為：將體重2~3g的可口革囊星蟲，在裝有濕海泥的塑料桶中養一周待其狀態穩定，取健康的可口革囊星蟲隨機分組，每組20只分別放入所配制的石油烴培養液中培養7d~10d，試驗期間水溫穩定為20℃~25℃，并在實驗的第0、1、2、4、7天，獲取可口革囊星蟲的體腔液細胞。

6.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于：所述DNA損傷狀況的檢測方法為單細胞凝膠電泳分析，其包括采用三層鋪膠法制片、細胞裂解、解旋及電泳、中和、染色、鏡檢6個步驟。

7.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于：所述口革囊星蟲體腔液細胞細胞DNA的損傷狀況分析采用SPSS軟件統計分析。