[發(fā)明專利]一種糖尿病腎病檢測試紙

有效

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• 申請日: 2014-07-03
• 公開（公告）號: CN104034904A
• 公開（公告）日: 2014-09-10
• 發(fā)明（設計）人: 岳朋;周錦源;盛威瑋
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳市領治醫(yī)學科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 深圳市精英專利事務所 44242
• 代理人: 任哲夫

技術領域

本發(fā)明屬于醫(yī)學體外診斷技術領域，涉及一種糖尿病腎病檢測試紙。

背景技術

糖尿病是一種以高血糖為特征的代謝性疾病。高血糖則是由于胰島素分泌缺陷或其生物作用受損，或兩者兼有引起。糖尿病時長期存在的高血糖，導致各種組織，特別是眼、腎、心臟、血管、神經(jīng)的慢性損害、功能障礙，這些稱為糖尿病并發(fā)癥。在眾多糖尿病并發(fā)癥中，由于長期高血壓和沒有很好控制的高血糖導致糖尿病腎病，引起糖尿病患者的慢性腎衰竭或尿毒癥，是晚期糖尿病患者死亡的主要原因。因此，對于中國1億多的糖尿病患者來說，對于糖尿病腎病的早期診斷顯得尤為重要。

傳統(tǒng)的糖尿病腎病早期診斷方法在各方面都存在一些不足之處，如傳統(tǒng)的血肌氨酸酐判斷腎臟疾病的方法，腎臟疾病的漏診率達到62％；傳統(tǒng)的尿白蛋白的診斷方法，受很多藥物等因素的影響，很高的假陽性和假陰性；傳統(tǒng)的尿微量蛋白的診斷方法，雖然可以作為絕大多數(shù)腎臟疾病的診斷標準，但是不適用于II糖尿病引起的糖尿病腎病，漏診率50-60％；國際上幾個頂級實驗室結(jié)果表明尿結(jié)合珠蛋白可以通過計算尿肌氨酸酐的濃度，來判斷II型糖尿病引起的糖尿病腎病，但是由于需要計算尿肌氨酸酐的濃度，操作過于復雜，很難廣泛應用于臨床上糖尿病腎病的診斷，現(xiàn)今針對“糖尿病腎病的準確診斷”，主要通過診斷腎臟疾病以及糖尿病腎病的“金標準”診斷指標——肌氨酸酐清除率做參照，該項指標可以準確的反應腎小球濾過率功能，從而直接判斷腎臟功能的好壞。但是，由于該項指標診斷復雜，一般很少用于臨床診斷，不僅僅需要復雜的計算公式，還需要準確測量尿流量(毫升/小時)、血肌氨酸酐的濃度和尿肌氨酸酐的濃度，因此，這項“金標準”主要用于醫(yī)學研究中。研究表明，尿結(jié)合珠蛋白(haptoglobin)是糖尿病腎病的新型靶標，并且該生物靶標通過計算尿肌氨酸酐的濃度，可以早期發(fā)現(xiàn)II型糖尿病腎病。但是，這些研究過于學術化，其診斷標準操作很復雜，無法快速診斷糖尿病腎病，很難應用于實際的臨床中。

糖尿病腎病檢測試紙作為一種檢測糖尿病腎病的手段，具有快速、簡便、廉價的特點，全部檢測過程僅需3-10分鐘，不需其它任何儀器設備，操作也極其簡單，無需專業(yè)人員，攜帶方便，可隨時隨地進行，對標本既能成批檢測，又可單份檢測。但是，現(xiàn)有的糖尿病腎病檢測試紙通過膠體金免疫層析法對尿液進行檢測，只能針對I型糖尿病或II型糖尿病進行檢測，而且檢測的準確性不高，無法作為準確的檢測診斷依據(jù)。

發(fā)明內(nèi)容

糖尿病腎病的時候，尿微量白蛋白如果異常，尿液中尿微量白蛋白表現(xiàn)為增加；相反地，糖尿病腎病患者的尿結(jié)合珠蛋白如果異常，尿液中尿結(jié)合珠蛋白表現(xiàn)為下降。但是，很多情況下，即使是患有糖尿病腎病，二者仍然可能表現(xiàn)為單個指標正常，從而造成漏診。針對上述問題，本發(fā)明提供一種快速準確的糖尿病腎病檢測試紙，具體方案如下：

一種糖尿病腎病檢測試紙，從上到下包括依次層疊的吸水濾紙、玻璃纖維素膜、NC膜，所述的試紙橫向方向設有T1檢測區(qū)、T2檢測區(qū)和T3參照區(qū)；所述的NC膜在T1檢測區(qū)包被有尿微量白蛋白抗體，在T2檢測區(qū)包被有尿結(jié)合珠蛋白抗體，在T3參照區(qū)包被有鼠抗人IgG；所述的玻璃纖維素膜在T1檢測區(qū)包被有膠體金標記的尿微量白蛋白，在T2檢測區(qū)包被有膠體金標記的尿結(jié)合珠蛋白，在T3參照區(qū)包被有膠體金標記的鼠抗人IgG蛋白。所述的尿微量白蛋白抗體是根據(jù)尿微量白蛋白特異C端結(jié)構(gòu)產(chǎn)生的多種抗體；所述的尿結(jié)合珠蛋白抗體是根據(jù)尿結(jié)合珠蛋白特異C端結(jié)構(gòu)產(chǎn)生的多種抗體。

所述的膠體金標記的尿微量白蛋白的制備方法為：

取0.01％HAuCl₄水溶液100ml，加熱至沸騰，迅速加入1％枸櫞酸三鈉水溶液2.5ml，繼續(xù)沸騰加熱至溶液出現(xiàn)橙紅色，得到膠體金溶液。

尿微量白蛋白對低離子強度的水透析，用微孔濾膜或超速離心除去蛋白質(zhì)溶液中的細小微粒，得到尿微量白蛋白儲存液，分別取尿微量白蛋白儲存液，稀釋為15ug/ml、20ug/ml、25ug/ml、30ug/ml、35ug/ml、40ug/ml、45ug/ml、50ug/ml的系列稀釋液，分別取0.1ml的稀釋液加到1ml膠體金溶液中，另設一不加尿微量白蛋白質(zhì)的對照組，5min后加入0.1ml10％NaCl溶液，混勻后靜置2小時，能使膠體金穩(wěn)定的最適尿微量白蛋白量再加10％即為膠體金標記的尿微量白蛋白量。

所述的膠體金標記的尿結(jié)合珠蛋白的制備方法為：