[發明專利]一種用于評價三七抗凝活性的生物效價檢定方法

在審

• 申請號: 201410301969.2
• 申請日: 2014-06-27
• 公開（公告）號: CN105277666A
• 公開（公告）日: 2016-01-27
• 發明（設計）人: 王伽伯;肖小河;王艷輝;張雅銘
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第三〇二醫院
• 主分類號: G01N33/15
• 分類號: G01N33/15;G01N1/28
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262
• 代理人: 蘇蕾;高瑜

技術領域

本申請涉及一種用于評價三七抗凝活性的生物效價檢定方法。

背景技術

三七是一種常用的中藥，其法定來源為五加科植物三七Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根和根莖。又名為田七、山漆、金不換等。支根習稱“筋條”，根莖習稱“剪口”[5]。三七始載于《本草綱目》，距今已有400多年的用藥史。在國內外久負盛名，有“止血神藥”的美稱[12-14]。其性甘、微苦、溫；歸肝、胃經。具有散瘀止血、消腫定痛的功效。臨床上多用于活血、止血。

《中國藥典》2010年版，在三七藥材項下主要收載性狀、顯微和薄層鑒別等，難以全面評價三七藥材品質，而建立適宜的活血化瘀生物活性檢測方法用于三七質量控制和品質評價，可以體現三七藥材功效特點，補充和完善現有的三七藥材質控模式的不足。

將生物活性測定法引入中藥質量控制和評價體現，不僅可以鑒定中藥品種和質量，而且可以評價藥效，尤其對于三七等化學成分復雜、理化方法不能表征其含量及理化測定不能反映生物活性和臨床療效的中藥而言，此方法對于不能反映生物活性和臨床療效的中藥而言，更能凸顯其優越性。

生物評價因具有藥效相關、整體可控等技術優勢，作為符合中醫藥特點的質量標準控制模式及方法，已成為中藥質量標準化的重要發展方向之一。中藥受品種、產地、加工方法等諸多因素的影響，造成了中藥質量的物質基礎變化大、質量難以控制的現象，并且其成分復雜、藥理作用多樣，僅控制少數成分不足以確保藥材或制劑的質量，無法擔任控制質量或反映療效的重任。因此，本申請試圖通過建立基于生物評價的中藥質量研究的方法，完善現有的質量控制標準，使臨床用藥更為安全有效。

參考文獻

[1]周應群,陳士林,張本剛,等.基于遙感技術的三七資源調查方法研究[J].中國中藥雜志,2006,30(24):1902-1905.

[2]王炳艷,韋美麗,陳中堅,等.文山三七產區土壤養分測試與分析[J].人參研究,2006,18(3):35-37.

[3]馮光泉,孫玉琴,崔秀明,等.有機三七基地選址標準操作規程[J].現代中藥研究與實踐,2012,2001.

[4]崔秀明,徐珞珊,王強,等.云南三七道地產區地質背景及土壤理化狀況分析[J].中國中藥雜志,2005,30(5):332-335.

[5]金航,崔秀明,陳中堅,等.三七栽培土壤地質背景分區特征[J].云南大學學報(自然科學版),2009,31440-445.

[6]簡在友,王文全,游佩進.三七連作土壤元素含量分析[J].中國現代中藥,2009,11(4):10-11.

[7]劉莉,趙安潔,楊雁,等.三七不同間隔年限種植土壤的理化性狀比較分析[J].西南農業學報,2013,26(5):1946-1952.

發明內容

本申請的目的是提供一種用于評價三七抗凝活性的生物效價檢定方法。

中藥質量生物評價方法不等同于一般的藥理學實驗方法，其同時具備定量藥理學與藥檢分析的雙重屬性和要求。本申請意在用生物效價檢測方法來評價三七藥材的品質，從而為其質量控制提供參考依據。一般來說，藥理學實驗方法主要是重現其趨勢和規律，重在證實試驗結果與對照組比較是否有統計學意義；因此，三七抗凝指標檢測結果主要是重現其抗凝活性的趨勢和規律，不一定要重現實驗數據的絕對值，重在證實實驗結果與對照組比較是否具有顯著性差異及統計學意義；而藥檢分析則要求重現試驗數據的絕對值，但允許有一定的誤差范圍，因此抗凝活性效價的檢定與化學成分分析方法相比，可從整體上對三七藥材的質量進行評價。此外，生物檢定重在評價活性作用大小，而不是要求證某一藥物是否具有某種藥理作用，更不是要求證其是通過什么藥理機制而發生作用的。

具體地，本申請提供一種用于評價三七抗凝活性的生物效價檢定方法，所述生物效價檢定方法包括以下步驟：

a.配制供試品溶液和供試品稀釋液

制備三七藥材樣品的干浸膏；

在測定前，用生理鹽水將所述干浸膏配置成供試品溶液，過濾除菌，貯存，優選地在4℃下進行貯存，備用；

測定時，估計供試品抗凝效價，用所述生理鹽水稀釋所述供試品溶液，得到不同濃度的供試品稀釋液；

b.配制對照品溶液和對照品稀釋液

用所述生理鹽水將阿司匹林配制成對照品溶液，過濾除菌，貯存，優選地在4℃下進行貯存，備用；

測定時，用所述生理鹽水稀釋所述對照品溶液，得到不同濃度的對照品稀釋液；

c.測試