[發(fā)明專利]一種用液相色譜法分離富馬酸二甲酯有關(guān)物質(zhì)的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410300575.5
• 申請(qǐng)日: 2014-09-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104165939A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-11-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王曉瑩;郭夏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京萬(wàn)全德眾醫(yī)藥生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 無(wú)
• 代理人: 無(wú)

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種液相色譜法分離分析富馬酸二甲酯及其有關(guān)物質(zhì)的方法。

背景技術(shù)

富馬酸二甲酯獲批用于治療復(fù)發(fā)-緩解型多發(fā)性硬化癥，成為第三種用于治療多發(fā)性硬化癥（MS）疾病緩解的口服藥物。富馬酸二甲酯，化學(xué)名為(E)-2-丁烯二酸二甲酯，英文通用名為Dimethyl?fumarate。分子式為C₆H₈O₄。富馬酸二甲酯結(jié)構(gòu)式為：

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在該化合物的生產(chǎn)過(guò)程中，有幾個(gè)雜質(zhì)可能會(huì)由于去除不完全而影響藥物的純度和質(zhì)量，這幾個(gè)雜質(zhì)即藥物質(zhì)量控制中的有關(guān)物質(zhì)，對(duì)于富馬酸二甲酯的生產(chǎn)過(guò)程中主要控制的有關(guān)物質(zhì)有4個(gè)，分別是原料富馬酸（Fumaric?acid）、雜質(zhì)1：順丁烯二酸單甲酯（Monomethyl?maleate）、雜質(zhì)2：順丁烯二酸二甲酯（Dimethyl?maleate）、雜質(zhì)3：富馬酸單甲酯（Monomethyl?fumarate），結(jié)構(gòu)式分別為

原料????????????????????????雜質(zhì)-01????????????????????????雜質(zhì)-02

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雜質(zhì)-03

對(duì)于富馬酸二甲酯生產(chǎn)過(guò)程中引入的有關(guān)物質(zhì)，在原料藥中是需要進(jìn)行質(zhì)量控制的，因此，實(shí)現(xiàn)富馬酸二甲酯及其有關(guān)物質(zhì)的分離與分析，對(duì)富馬酸二甲酯的質(zhì)量控制具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種分析富馬酸二甲酯純度以及分離其有關(guān)物質(zhì)的方法，從而實(shí)現(xiàn)富馬酸二甲酯與其有關(guān)物質(zhì)的分離和測(cè)定，從而保證富馬酸二甲酯的純度，實(shí)現(xiàn)其終產(chǎn)品原料藥的質(zhì)量控制。

本發(fā)明所述的用液相色譜法分析富馬酸二甲酯純度以及分離其有關(guān)物質(zhì)的方法，是采用以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的水系色譜柱，以一定比例的無(wú)機(jī)酸-有機(jī)相為流動(dòng)相。

本發(fā)明所述的色譜柱選自德國(guó)MN?NUCLEODUR?C18?Pyramid，優(yōu)選為MN-C₁₈。

本發(fā)明所述的有機(jī)相選自以下化合物：甲醇、乙腈、丙醇、異丙醇，優(yōu)選為甲醇或乙腈。

本發(fā)明所述的流動(dòng)相無(wú)機(jī)酸-有機(jī)相采用等度洗脫。

本發(fā)明所述的無(wú)機(jī)酸選自磷酸、甲酸、乙酸，優(yōu)選為磷酸。

上述所說(shuō)的方法中，其中無(wú)機(jī)酸溶液中包含的無(wú)機(jī)酸的濃度為0.1～0.5%，優(yōu)選濃度為0.1%。

本發(fā)明所述的分離測(cè)定方法，可按照以下方法實(shí)現(xiàn)：

1)?取富馬酸二甲酯樣品適量，用甲醇或流動(dòng)相溶解樣品，配制成每1mL含富馬酸二甲酯及其中間體0.1～1.5mg，優(yōu)選為0.5?mg/mL的樣品溶液。

2)?設(shè)置流動(dòng)相流速為0.5～1.5mL/min?，優(yōu)選為1.0mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為205～250nm，優(yōu)選為205nm，柱溫箱溫度為20～50℃，優(yōu)選為30℃。

3)?取（1）的樣品溶液5～50μL，優(yōu)選為5μL注入液相色譜儀，完成富馬酸二甲酯與有關(guān)物質(zhì)的分離測(cè)定。

本發(fā)明使用的儀器與最優(yōu)色譜條件為：

高效液相色譜儀的型號(hào)，無(wú)特別要求，本發(fā)明采用的色譜儀為島津：LC-20AT，?CBM-20A，SIL-20AC，SPD-M20A，CTO-10ASvp

色譜柱：C₁₈（MN-pyramid，250×4.6?mm，5μm）

流動(dòng)相：?A：0.1%的磷酸水；B：乙腈；采用等度洗脫；A：B=90:10

流速：1.0mL/min

檢測(cè)波長(zhǎng)：205nm

柱溫：30℃

進(jìn)樣體積：5μL。

本發(fā)明采用C₁₈（MN?NUCLEODUR?C18?Pyramid，250×4.6?mm，5μm），能夠有效地分離富馬酸二甲酯及其有關(guān)物質(zhì)。本發(fā)明解決了富馬酸二甲酯及其有關(guān)物質(zhì)的分離與分析問(wèn)題，從而確保了富馬酸二甲酯原料藥的質(zhì)量可控。?

附圖說(shuō)明

圖1為實(shí)施例1時(shí)富馬酸二甲酯HPLC色譜圖；

圖2為實(shí)施例1時(shí)的富馬酸二甲酯及其有關(guān)物質(zhì)HPLC色譜圖；

圖3為實(shí)施例2時(shí)富馬酸二甲酯HPLC色譜圖；

圖4為實(shí)施例2時(shí)的富馬酸二甲酯及其有關(guān)物質(zhì)HPLC色譜圖；

圖5為實(shí)施例3時(shí)的溶劑色譜圖；