[發(fā)明專利]一種五指毛桃的組織培養(yǎng)快速繁殖方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410298080.3 | 申請日: | 2014-06-26 |
| 公開(公告)號: | CN104106468A | 公開(公告)日: | 2014-10-22 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 李林軒;韋坤華;吳慶華;王曉峰;李翠;韋瑩;王一諾;繆劍華;林偉 | 申請(專利權(quán))人: | 廣西壯族自治區(qū)藥用植物園 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 廣西南寧公平專利事務(wù)所有限責(zé)任公司 45104 | 代理人: | 黃永校 |
| 地址: | 530023 廣西壯*** | 國省代碼: | 廣西;45 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 五指毛桃 組織培養(yǎng) 快速 繁殖 方法 | ||
1.一種五指毛桃組織培養(yǎng)快速繁殖方法,其特征在于:該方法包括以下步驟:
(1)外植體的選擇與消毒:取五指毛桃葉片作為外植體,依次用5%洗潔精水溶液浸泡5-10min、線狀自來水沖洗10-15min、添加了2-3滴吐溫-20的100毫升0.1%升汞消毒8-10min、無菌水沖洗3-5次,最后用消毒濾紙吸去表面水分,得到外植體,所述無菌水為經(jīng)高壓滅菌的蒸餾水,
(2)葉片分化獲得叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng):將步驟(1)得到的外植體接種到MS培養(yǎng)基中,在培養(yǎng)溫度為23-26℃,光照強(qiáng)度1400-2000lux,光照時間為10-12小時/天的條件下培養(yǎng)30天,葉片分化后獲得叢生芽,其中MS培養(yǎng)基中含0.5-1.5mg/L的6-BA、0.1-0.5mg/L的NAA、0.1-0.5mg/L的2,4-D、25-30g/L蔗糖和3.8-4.8g/L的瓊脂,培養(yǎng)基的pH值為5.8,
(3)叢生芽繁殖培養(yǎng):將步驟(2)中得到的叢生芽置于MS繁殖培養(yǎng)基中,在培養(yǎng)溫度23-26℃,光照強(qiáng)度1400-2000lux,光照時間為10-12小時/天的條件下培養(yǎng)40天得到健壯植株,其中MS繁殖培養(yǎng)基中含0.1-0.5mg/L的IAA、0.1-0.5mg/L的KT、25-30g/L蔗糖和3.8-4.8g/L的瓊脂,培養(yǎng)基的pH值為5.8,
(4)無菌苗生根培養(yǎng):將步驟(3)中得到的叢生芽切成單芽置于1/2MS生根培養(yǎng)基中,在培養(yǎng)溫度23-26℃,光照強(qiáng)度1400-2000lux,光照時間為10-12小時/天的條件下培養(yǎng)40天得到帶根的完整植株,其中MS生根培養(yǎng)基中含0.5-1.5mg/L的IBA、0.1-0.5mg/L的NAA、25-30g/L蔗糖和3.8-4.8g/L的瓊脂,培養(yǎng)基的pH值為5.8,
(5)煉苗與移栽:步驟(4)獲得帶根的完整植株后,在室溫為25℃的室內(nèi)打開瓶蓋,在瓶中加入少量自來水,煉苗2-4天,表面角質(zhì)形成后將苗取出,洗凈根部培養(yǎng)基,立即移栽到按質(zhì)量比為泥炭土:珍珠巖=1:1的基質(zhì)中,在該基質(zhì)中生長一個月后移栽大田。
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