[發明專利]一種組織培養法生產富硒大米蛋白的方法

有效

• 申請號: 201410294093.3
• 申請日: 2014-06-27
• 公開（公告）號: CN104041654A
• 公開（公告）日: 2014-09-17
• 發明（設計）人: 付湘晉;林親錄;任佳麗;吳偉;吳越
• 申請（專利權）人: 中南林業科技大學
• 主分類號: A23J1/12
• 分類號: A23J1/12;A01H4/00
• 代理公司: 長沙星耀專利事務所 43205
• 代理人: 寧星耀;許伯嚴

1.?一種組織培養法生產富硒大米蛋白的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）清洗：將新鮮糙米或稻米胚用自來水沖洗；

（2）消毒：將經步驟（1）清洗的新鮮糙米或稻米胚用消毒液浸泡消毒5min-30min，然后再用無菌水清洗，共循環消毒-清洗1-5次；

（3）胚組織培養：

將經過步驟（2）消毒的新鮮糙米或稻米胚置于經過滅菌的發酵容器中，添加無菌浸泡液，在搖床轉速80-110r/min、溫度20-35℃下，發酵12-96h；　

或者將經過步驟（2）消毒的新鮮糙米或稻米胚置于經過滅菌的發酵容器中，添加無菌浸泡液，在15－35℃下浸泡4－24h，再置于發酵淺盤中，在?20－35℃下培養12－48h；

所述無菌浸泡液中含無機硒及植物生長調節劑；

（4）收集培養物：采用離心或過濾的方法收集經步驟（3）培養的新鮮糙米或稻米胚，再水洗，打漿；

（5）提取蛋白：先用0.1-2N的NaOH溶液調pH值至9-13，攪拌，過濾，取濾液，加0.1-2N的HCl溶液調pH值至5-7，過濾，收集濾渣，即得。

2.根據權利要求1所述的組織培養法生產富硒大米蛋白的方法，其特征在于，步驟（1）中，所述新鮮糙米或稻米胚為當年采收之稻谷加工的糙米或稻米胚。

3.根據權利要求1或2所述的組織培養法生產富硒大米蛋白的方法，其特征在于，步驟（2）中，所述消毒液為次氯酸鈣溶液、次氯酸鈉溶液、二氧化氯溶液、氯溶液、雙氧水、臭氧溶液、酸性氧化電位水、過氧乙酸溶液、乙醇溶液或草酸溶液。

4.根據權利要求1或2所述的組織培養法生產富硒大米蛋白的方法，其特征在于，步驟（3）中，所述搖床培養的時間為48-72h。

5.根據權利要求1或2所述的組織培養法生產富硒大米蛋白的方法，其特征在于，步驟（3）中，所述發酵淺盤中培養的時間為?24－30h。

6.根據權利要求1或2所述的組織培養法生產富硒大米蛋白的方法，其特征在于，步驟（3）中，所述無菌浸泡液無機硒中的硒元素的濃度為5mg/L-80mg/L。

7.根據權利要求1或2所述的組織培養法生產富硒大米蛋白的方法，其特征在于，步驟（3）中，所述無機硒源亞硒酸鈉和/或亞硒酸。

8.根據權利要求1或2所述的組織培養法生產富硒大米蛋白的方法，其特征在于，步驟（3）中，所述植物生長調節劑包括2,4-二氯苯氧乙酸、激動素、α-萘乙酸、6-芐氨基嘌呤，所述無菌浸泡液中植物生長調節劑的濃度分別為：2,4-二氯苯氧乙酸的濃度為0.5-6.5?mg/L、激動素的濃度為0-2.0?mg/L、α-萘乙酸的濃度為0-1.0?mg/L?、6-芐氨基嘌呤的濃度為0-2.0?mg/L。

9.根據權利要求1或2所述的組織培養法生產富硒大米蛋白的方法，其特征在于，步驟（5）中，所述NaOH溶液的濃度為0.5-1N。

10.根據權利要求1或2所述的組織培養法生產富硒大米蛋白的方法，其特征在于，步驟（5）中，所述HCl溶液的濃度為0.5-1N。