[發明專利]一種連續式制備高純度辣椒堿類物質的方法

有效

• 申請號: 201410287884.3
• 申請日: 2014-06-25
• 公開（公告）號: CN104058987A
• 公開（公告）日: 2014-09-24
• 發明（設計）人: 崔波;趙培培;檀琮萍;盧艷敏
• 申請（專利權）人: 齊魯工業大學
• 主分類號: C07C233/20
• 分類號: C07C233/20;C07C231/24
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 張貴賓

（一）技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，特別涉及一種連續式制備高純度辣椒堿類物質的方法。

（二）背景技術

辣椒堿是一種香草酰胺類生物堿，是辣椒中呈辣味物質辣椒類化合物中的主要成分，由于其具有特殊的物理化學性質及生理活性，在食品、農業、軍事、醫藥等領域引起了廣泛的專注。雙水相萃取技術從辣椒精中提取得到的粗提物中除了含有大量的辣椒堿類物質外還有較多色素等雜質，直接用粒徑比較小的反相填料柱進行純化制備高純度的辣椒堿單體時，色素等雜質容易堵塞色譜柱大大降低色譜柱的純化效果，甚至得不到辣椒堿單體。故一般在用反相色譜純化辣椒堿單體前，用大孔色譜柱分離除去色素等雜質。批處理色譜分離不能實現連續進樣，而且也存在一些缺點：分離不連續、色譜柱的利用低、溶劑的消耗大、產品的濃度低；而且，色譜柱的放大十分復雜。

模擬移動床色譜系統是使用電磁閥來控制進樣口的變動以“模擬”移動床的效果，使色譜的優點得以保留而移動床的優點也能體現。模擬移動床技術與色譜結合使色譜分離從間歇變為連續，而色譜的高分離率、低能耗、低物耗、常溫運行等優點繼續保留，由于模擬了逆流，固定相和流動相能反復利用，從而大大提高了效率，降低了成本；模擬移動床色譜是在譜帶首尾切取餾份，使提純過程更易控制；由于引進了精餾，回流機制，使分離能力增加，產品收率提高；又由于引進了連續機制，大大提高了產率。本發明提供的模擬移動床大孔樹脂分離技術可以有效解決連續快速純化辣椒堿類物質的難題。

（三）發明內容

本發明為了彌補現有技術的不足，提供了一種生產成本低、產品收率高的連續式制備高純度辣椒堿類物質的方法。

本發明是通過如下技術方案實現的：

一種連續式制備高純度辣椒堿類物質的方法，以辣椒堿類物質粗提物為原料，利用6柱三帶模擬移動床設備，柱連接方式為2-2-2，以大孔樹脂為填料，柱移動方向和流動相流動方向相反，連續將辣椒堿類物質從辣椒堿類物質粗提物中分離出來，其分離步驟如下：

（1）采用泵A將進樣液F辣椒堿類物質粗提物泵入色譜柱，進樣液口和殘余液流出口之間為Ⅲ帶吸附帶，此區有2個色譜柱，進樣液中的弱極性物質被吸附在大孔樹脂上，隨固定相進入Ⅱ帶精餾帶，不能吸附的從殘余液流出口留出；

（2）采用泵B將洗脫液D即體積比為20-40%的乙醇溶液泵入Ⅱ帶精餾帶，此區有兩個色譜柱位于洗脫液入口和進樣口之間，比辣椒堿類物質極性偏大的物質被從樹脂上沖洗出來進入Ⅲ帶吸附帶，而辣椒堿類物質則隨固定相的移動進入Ⅰ帶洗脫帶；

（3）采用泵C將沖洗液C泵入Ⅰ帶洗脫帶，將從Ⅱ帶精餾帶移動過來的固定相上的辣椒堿類物質洗脫下來，得到產品。

本發明的更優技術方案為：

辣椒堿類物質粗提物通過有機溶劑萃取法或雙水相法從辣椒精中獲得。

步驟（1）中，隨機液相測定殘余液中是否有辣椒堿被洗出，通過改變工藝條件使辣椒堿不被洗出，工藝條件包括洗脫液流速、進樣流速、洗脫液洗脫強度和切換時間。

步驟（1）中，進樣液F中，乙醇的體積含量為20%，進樣液F的流速為10-20mL/min。

步驟（2）中，洗脫液D的流速為8-12mL/min，沖洗液的流速為10-20mL/min。

步驟（3）中，比辣椒堿類物質極性更弱的物質保留在柱子上進入Ⅲ帶吸附帶，測定萃取液中辣椒堿類物質的純度，通過調整流速、沖洗液洗脫強度和切換時間使得辣椒堿類物質的純度達到要求。

步驟（3）中，分離過程中各帶的切換時間為20-50min，分離過程中，多個周期后當萃取液中雜質含量有所增高后，停止進樣，進行再生，即用乙醇以10-20mL/min的速度沖洗所有色譜柱。

上述工藝中通過高效液相色譜法測定辣椒堿的含量并計算提取率，測定條件為：島津LC-20A HPLC系統，ODS柱(Inersil ODS-3，4.6×250mm，5μm)，以75%（v/v）的甲醇水溶液為流動相，流速為1mL/min，柱溫為室溫，樣品進樣量為20μL，檢測器為二極管陣列檢測器，檢測波長為280 nm，用于液相測定的樣品都經過0.45μm的濾膜過濾。

與現有技術相比，本發明的有益效果是發明了一種連續大量制備辣椒堿類物質的技術，不僅克服了批處理色譜的缺點從而節約能耗，降低生產成本，提高生產效率，而且能大大提高分離度，使獲得的辣椒堿類物的純度大大提高，為高效制備高純度的辣椒堿單體提供了有利條件。

（四）附圖說明

下面結合附圖對本發明作進一步的說明。

圖1為本發明的分離步驟示意圖。