[發明專利]一種篩選抗原不同結合位點的單克隆抗體的方法

有效

• 申請號: 201410283271.2
• 申請日: 2014-06-23
• 公開（公告）號: CN104020289A
• 公開（公告）日: 2014-09-03
• 發明（設計）人: 賴增祖;葉欣;徐健;賴曉娟;楊奎東
• 申請（專利權）人: 寧波艾科生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;C07K16/28
• 代理公司: 南京知識律師事務所 32207
• 代理人: 張鉑

1.一種篩選抗原不同結合位點的單克隆抗體的方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）將具有2個或2個以上抗原決定簇的抗原免疫小鼠，分離小鼠的脾臟細胞，并將小鼠脾臟細胞和小鼠骨髓瘤細胞SP2/0融合,?用ELISA方法篩選出陽性單克隆抗體雜交瘤細胞株，并分別將各個陽性單克隆抗體雜交瘤細胞株進行克隆化培養，再將每株單克隆抗體雜交瘤細胞分別培養，分別得到不同陽性單克隆抗體雜交瘤細胞的培養上清液；

（2）將步驟（1）得到的不同陽性單克隆抗體雜交瘤細胞的培養上清液以兩兩組合的方式分別加入到共價交聯有蛋白A或G的膠乳顆粒的溶液中，孵育后加入抗原,?測定600nM的吸光度，光吸收度沒有改變的單克隆抗體組為一對具有相同抗原結合位點的單克隆抗體，光吸收度增加的單克隆抗體組為一對具有不同抗原結合位點的單克隆抗體。

2.如權利要求1所述的單克隆抗體的篩選方法，其特征在于所述抗原為cTni,?BNP,?RBP,?LPPLA2,?PCT,?HbA1c,?纖溶酶原,?纖溶酶抑制劑或ST2。

3.如權利要求1或2所述的單克隆抗體的篩選方法，在制備雙抗夾心ELISA檢測法所需的配對單克隆抗體中的應用。

4.如權利要求1或2所述的單克隆抗體的篩選方法，在制備雙抗夾心ELISA檢測試劑盒中的應用。