[發(fā)明專利]離心沉降輔助植物轉(zhuǎn)基因的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410283216.3
• 申請(qǐng)日: 2014-06-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104017825B
• 公開(kāi)（公告）日: 2016-11-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王貴榮;李斌連;唐克軒
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海交通大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/84
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/84;A01H5/00
• 代理公司: 上?？剖⒅R(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31225
• 代理人: 楊元焱

1.一種離心沉降輔助植物轉(zhuǎn)基因的方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟一，通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)，得到無(wú)菌的植物材料；

步驟二，從獲得的無(wú)菌植物材料中切取受體部位，作為植物受體材料；

步驟三，將包含有目的基因的農(nóng)桿菌活化到轉(zhuǎn)化狀態(tài)后，在5000-10000rpm條件下離心并重懸，得到農(nóng)桿菌重懸液；

步驟四，把植物受體材料浸泡到農(nóng)桿菌重懸液中，再次進(jìn)行離心處理；

步驟五，將步驟四中離心處理后的材料轉(zhuǎn)移到無(wú)菌玻璃器皿中靜置15-20分鐘；

步驟六，靜置時(shí)間結(jié)束后，把感染后的植物材料從玻璃器皿中取出來(lái)，用無(wú)菌濾紙吸干殘留的菌液，然后轉(zhuǎn)移到共培養(yǎng)基中共培養(yǎng)；

步驟七，共培養(yǎng)結(jié)束后，將感染過(guò)的植物受體材料在選擇壓力下進(jìn)行篩選，最終獲得陽(yáng)性轉(zhuǎn)化子。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的離心沉降輔助植物轉(zhuǎn)基因的方法，其特征是：步驟四中所述的離心處理是，在25℃下，5000-8000rpm離心5-10min。