[發明專利]一種泥螺寡肽在抗前列腺癌中的應用

有效

• 申請號: 201410277152.6
• 申請日: 2014-06-20
• 公開（公告）號: CN105238833B
• 公開（公告）日: 2021-01-15
• 發明（設計）人: 聞正順;馬劍茵;曹玉昊;林煥樂;胡俊峰
• 申請（專利權）人: 浙江海洋學院
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K14/435;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/16;A61K38/17;A61P35/00
• 代理公司: 寧波誠源專利事務所有限公司 33102
• 代理人: 袁忠衛

本發明涉及一種泥螺寡肽在抗前列腺癌中的應用，尤其涉及該泥螺寡肽在抗前列腺癌DH?145腫瘤細胞藥物中的應用。該泥螺寡肽的氨基酸序列為Gln?Pro?Pro?Gly?Leu，以泥螺為原料，通過胰蛋白酶酶解泥螺組織，結合凝膠層析和高效液相色譜分離純化獲得。本發明中的泥螺寡糖可對前列腺癌DH?145腫瘤細胞顯著抑制，其中對DH?145細胞的增殖抑制率可達33.5～88.4％，對前列腺癌DH?145細胞的早期凋亡和晚期凋亡的影響率分別為20～22.27％和28～30.66％，可見具有顯著地抗腫瘤活性。泥螺寡肽具有良好的開發前景，對泥螺寡糖的抗前列腺癌DH?145腫瘤細胞的研究可為抗前列腺癌藥物的開發研究提供理論支持。

技術領域

本發明涉及泥螺酶解寡肽的應用，具體涉及一種泥螺寡肽在抗前列腺癌藥物中的應用。

背景技術

泥螺(Bullacta exarata)，俗稱“吐鐵”、“黃泥螺”、“梅螺”等，屬軟體動物門、腹足綱、后鰓亞綱、頭楯目、阿地螺科、泥螺屬，為太平洋西岸海水及咸淡水特產的種類，由貝殼和軟體兩部分組成，含有豐富的蛋白質、鈣、磷、鐵和維生素等成分，寡肽物質豐富，在我國廣泛分布于東海和黃海兩側的長江，是一種常見的水產品。

惡性腫瘤是一類嚴重威脅人類健康和生命的疾病，發病率越來越高，目前已有的化療藥物雖對大多數腫瘤有一定的療效，但選擇性差、毒副反應大、耐藥性等問題依然非常明顯。因此，尋找高效、低毒、特異強的抗腫瘤藥物仍勢在必行。寡肽因其分子量小、無免疫原性、活性高、副作用小，尤其是對多藥抗性的腫瘤細胞系也有很好的抑制活性。海洋生物寡肽是目前海洋生物活性物質研究的一個重要領域，一些生物活性寡肽常以非活性狀態存在于蛋白質中，這些蛋白質經過蛋白酶的水解作用，使得隱藏于其中的活性肽釋放出來，有可能發揮出比蛋白質更多的生物活性。例如：如鄧偉等發現藻藍蛋白酶解寡肽對人宮頸癌HeLa細胞株的體外生長有明顯的抑制作用；楊永芳等酶解紫貽貝所得的紫貽貝寡肽對前列腺癌PC-3細胞和DU-145細胞有特異性的增殖抑制作用，并且對DU-145細胞的抑制作用強于對PC-3細胞的增殖抑制作用；姚如永等研究泥蚶寡肽在0.25-1.0g·L^-1范圍內，寡肽能明顯的抑制肺癌細胞A549和Ketr-3細胞的增殖，同時還能抑制細胞蛋白質的合成，并呈明顯的劑量依賴性。

前列腺癌為男性高發的惡性腫瘤，其死亡率高居癌癥死亡率的第二位，僅次于肺癌。近年來，隨著人們生活方式的改變、人口的老齡化以及診斷水平的不斷提升，我過前列腺癌的發病率明顯呈上升趨勢。前列腺癌DU-145細胞是從前列腺癌腦轉移腫瘤中分離出來的，分化程度低，為雄激素依賴的前列腺癌細胞，具有強大的轉移潛能，缺乏內源性的雄激素受體的表達。DU-145細胞完全貼壁的時間通常為24h內，具有較強的侵襲和促血管新生能力。研究泥螺酶解寡肽多前列腺癌DU-145細胞的抑制作用，對前列腺癌藥物的理論研究具有重要意義。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是在酶解泥螺組織獲取泥螺寡肽的基礎上，提供一種泥螺寡肽在抗前列腺癌藥物中的應用，尤其是抗前列腺癌DU-145腫瘤細胞。

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為：一種泥螺寡肽在抗前列腺癌DU-145細胞藥物中的應用，其特征在于：所述泥螺寡肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所述，其中藥物的具體實現形態可為片劑、膠囊劑、顆粒劑或丸劑等。

上述泥螺寡肽通過以下步驟制得：新鮮泥螺洗凈去殼，取泥螺組織搗碎勻漿，用鹽酸溶液和氫氧化鈉溶液將勻漿液的pH值調節為8～9，料液比為1：(3.8～4)加入0.4～0.5％勻漿液體積的胰蛋白酶，40～50℃保溫水解7～9h，水解完成后95～100℃、10～15min進行滅酶，4℃下水解液于9500～10000r/min離心15～20min，取上清液，經3kd超濾膜超濾獲得分子量小于3kd的第一組分，將該第一組分經凝膠層析洗脫獲得第二組分，最后將該第二組分反相高效液相色譜分離獲得所述泥螺寡肽。