[發(fā)明專利]一種泥螺寡肽在抗前列腺癌中的應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410277152.6 | 申請日: | 2014-06-20 |
| 公開(公告)號: | CN105238833B | 公開(公告)日: | 2021-01-15 |
| 發(fā)明(設計)人: | 聞正順;馬劍茵;曹玉昊;林煥樂;胡俊峰 | 申請(專利權)人: | 浙江海洋學院 |
| 主分類號: | C12P21/06 | 分類號: | C12P21/06;C07K14/435;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/16;A61K38/17;A61P35/00 |
| 代理公司: | 寧波誠源專利事務所有限公司 33102 | 代理人: | 袁忠衛(wèi) |
| 地址: | 316022 浙江省*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 寡肽 前列腺癌 中的 應用 | ||
1.一種泥螺寡肽在制備抗前列腺癌DU-145細胞藥物中的應用,其特征在于:所述泥螺寡肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所述,
上述泥螺寡肽通過以下步驟制得:新鮮泥螺洗凈去殼,取泥螺組織搗碎,加入蒸餾水勻漿,料液比為1:(3~4),用鹽酸溶液和氫氧化鈉溶液將勻漿液的pH值調節(jié)為8~9,加入0.4~0.5%勻漿液體積的胰蛋白酶, 40~50℃保溫水解7~9h,水解完成后95~100 ℃、10~15min 進行滅酶,4℃下水解液于 9500~10000 r/min 離心 15~20min ,取上清液,經(jīng)3kd超濾膜超濾獲得分子量小于3kd的第一組分,將該第一組分經(jīng)凝膠層析洗脫獲得第二組分,最后將該第二組分反相高效液相色譜分離獲得所述泥螺寡肽,
所述凝膠層析條件如下:所述第一組分的濃度為48~50mg/mL、上樣量為3~4mL、速度為2.5~3.5ml/min,流動相為超純水,280nm紫外檢測,
所述反相高效液相條件如下:選用Zorbax SB-C18,4.6×250,5um;柱溫為20℃;流動相為1%TFA和乙腈;梯度洗脫:從開始到30min結束,乙腈濃度從0變化到40%,洗脫速度為1.0mL/min;進樣體積為50ul紫外檢測波長分別為214nm、280nm。
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