[發(fā)明專利]一種蘇云金芽胞桿菌液態(tài)培養(yǎng)基及其制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410276046.6
• 申請(qǐng)日: 2014-06-19
• 公開（公告）號(hào): CN104046583A
• 公開（公告）日: 2014-09-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄭琦;周軍;姚祖杰;林白容;章秋萍;馬蓉;袁瀚;沈小娟;關(guān)雄;黃小紅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 瀘州品創(chuàng)科技有限公司;福建農(nóng)林大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12R1/07
• 代理公司: 成都虹橋?qū)＠聞?wù)所(普通合伙) 51124
• 代理人: 梁鑫

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物培養(yǎng)基技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種蘇云金芽胞桿菌液態(tài)培養(yǎng)基及其制備方法。

背景技術(shù)

蟲害是限制農(nóng)作物穩(wěn)高產(chǎn)的一個(gè)重要的因素，每年被害蟲侵吞的糧食占總產(chǎn)量的1/4左右。長久以來人們投入大量的精力去研制化學(xué)農(nóng)藥，卻沒能解決問題，同時(shí)還面臨著一些無法解決的問題，如人畜中毒，環(huán)境污染等。因此隨著人們環(huán)保意識(shí)的不斷增強(qiáng)，生物農(nóng)藥引起越來越多的關(guān)注。

蘇云金芽胞桿菌(Bacillus?thuringiensis，簡稱Bt)是內(nèi)生芽胞的革蘭氏陽性菌，在芽胞形成初期會(huì)形成殺蟲晶體蛋白(insecticidal?crystal?protein，簡稱ICP)，其對(duì)目標(biāo)害蟲高效專一，對(duì)非目標(biāo)生物安全，對(duì)鱗翅目、膜翅目、雙翅目、鞘翅目和同翅目等多種害蟲有特異殺蟲活性。蘇云金芽孢桿菌制劑克服了傳統(tǒng)化學(xué)農(nóng)藥危害人畜、污染環(huán)境和易產(chǎn)生抗性等缺點(diǎn)，具有安全、選擇性強(qiáng)和原料簡單等優(yōu)點(diǎn)，是目前世界上產(chǎn)量最大的微生物殺蟲劑。近幾十年來，人們對(duì)蘇云金芽胞桿菌的發(fā)酵生產(chǎn)做了大量的研究，已形成了較為成熟的生產(chǎn)工藝，且蘇云金芽胞桿菌對(duì)生存環(huán)境要求不高，在含氮0.075％～0.225％，含糖0.1％～1.5％和碳氮比0.44～20.0％的范圍內(nèi)都能良好地生長。目前，一般采用成本低、當(dāng)?shù)乜傻玫墓まr(nóng)業(yè)廢棄物作為發(fā)酵生產(chǎn)蘇云金芽胞桿菌的原料，例如，淀粉工廠廢液、食用菌菌糠、蠶絲蠶蛹廢料、沼渣、味精廢水等都被嘗試作為Bt發(fā)酵生產(chǎn)的原料。

白酒以大米、玉米、糯米、高粱、大麥、小麥、豌豆等為主要原料，以高粱糠、玉米蕊、稻殼等為填充料，采用固態(tài)或半固態(tài)法釀造、蒸餾而成，蒸餾之后的殘?jiān)褪前拙凭圃恪?jù)統(tǒng)計(jì)，我國白酒釀造業(yè)每年耗糧2000萬噸，產(chǎn)生1700萬噸的白酒酒糟。白酒酒糟中含有7％～11％的淀粉，豐富的蛋白質(zhì)和氨基酸，還含有豐富的磷、鉀等無機(jī)元素及戊糖、總糖和脂肪等成分，此外，還可能存在由微生物菌體產(chǎn)生的核糖核酸、嘌呤等微量有益成分，但是白酒酒糟中含有殘留的酒精、醛和雜醇油等，呈酸性，極易腐敗變質(zhì)，如果不加以處理，會(huì)嚴(yán)重污染環(huán)境。目前，白酒酒糟已經(jīng)運(yùn)用到很多方面，如，利用白酒酒糟制取甘油、培養(yǎng)食用菌、提取復(fù)合物氨基酸及微量元素、生產(chǎn)飼料蛋白等。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種蘇云金芽胞桿菌液態(tài)培養(yǎng)基及其制備方法。本發(fā)明既解決了白酒酒糟污染環(huán)境的問題，又實(shí)現(xiàn)了釀酒業(yè)廢棄資源的充分利用，還降低了生物農(nóng)藥的生產(chǎn)成本，變廢為寶。

本發(fā)明所解決的第一個(gè)技術(shù)問題是提供一種蘇云金芽胞桿菌液態(tài)培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基由以下重量配比的組分混合稀釋而成：白酒酒糟提取液75～125份、黃豆餅粉0.5～6份、酵母0.075～0.275份、碳酸鈣0.1～0.4份、磷酸二氫鉀0.075～0.275份、硫酸錳0.0075～0.0275份、硫酸鋅0.0075～0.0275份。

優(yōu)選的，上述培養(yǎng)基由以下重量配比的組分混合稀釋而成：白酒酒糟提取液95～105份、黃豆餅粉1～4份、酵母0.1～0.25份、碳酸鈣0.2～0.3份、磷酸二氫鉀0.1～0.25份、硫酸錳0.01～0.025份、硫酸鋅0.01～0.025份。

最優(yōu)選的，上述培養(yǎng)基由以下重量配比的組分混合稀釋而成：白酒酒糟提取液100份、黃豆餅粉2份、酵母0.2份、碳酸鈣0.25份、磷酸二氫鉀0.2份、硫酸錳0.02份、硫酸鋅0.02份。

具體的，上述培養(yǎng)基中，白酒酒糟提取液的制備方法為：將白酒酒糟干燥至含水量在15％以下，粉碎后加入酸溶液、堿溶液或水在50～121℃下浸泡1～3h，離心，收集上清液，再調(diào)節(jié)pH至6.5～7.5，稀釋1～3倍，即為白酒酒糟提取液。

進(jìn)一步的，上述培養(yǎng)基中，白酒酒糟提取液的制備方法中邊浸泡邊攪拌。

優(yōu)選的，上述培養(yǎng)基中，白酒酒糟提取液的制備方法中每1L酸溶液中加入1～4kg干燥后的白酒酒糟。

具體的，上述培養(yǎng)基中，白酒酒糟提取液的制備方法中所述的酸溶液為體積濃度0.5～2.0％硫酸。

具體的，上述培養(yǎng)基中，白酒酒糟提取液的制備方法中所述的堿溶液為氫氧化鈉水溶液或氫氧化鈣水溶液中的任意一種。

進(jìn)一步的，所述氫氧化鈉水溶液的濃度為0.5～2.0g/100mL。

進(jìn)一步的，所述氫氧化鈣水溶液的濃度為0.2～4.0g/100mL。

進(jìn)一步優(yōu)選的，上述培養(yǎng)基中，白酒酒糟提取液的制備方法中每1L氫氧化鈉水溶液中加入干燥后的白酒酒糟1～4kg。