技術領域

本發(fā)明涉及基因?qū)氩牧霞夹g領域，具體涉及一種功能化納米基因?qū)氩牧霞捌渲苽浞椒ê蛻谩?/p>

背景技術

基因?qū)敕椒梢苑譃閮深悾旱谝活愂遣《拘突驅(qū)敕椒ǎ且阅孓D錄病毒、腺病毒、腺相關病毒為載體；第二類是非病毒型基因?qū)敕椒ǎ顼@微注射、基因槍、磷酸鈣共沉淀、陽離子脂質(zhì)體法、以及利用新興的納米基因?qū)氩牧线M行基因轉染。

病毒型基因?qū)敕椒ù嬖谠S多嚴重的不足，例如病毒轉染時有可能激活原癌基因。因此，非病毒型基因?qū)敕椒ㄊ悄壳暗难芯繜狳c，但是，上述所述的非病毒型基因?qū)敕椒ň嬖诓蛔悖猴@微注射一次只能處理一個細胞，其轉染效率非常低；基因槍的穿透力十分有限；磷酸鈣共沉淀法的轉染效率受溫度、濃度、操作環(huán)境等眾多因素影響，轉染結果很不穩(wěn)定；陽離子脂質(zhì)體法雖然表現(xiàn)出良好的轉染效率，但是陽離子脂質(zhì)體因毒性高，使得陽離子脂質(zhì)體法的應用受到了限制；現(xiàn)有技術中的納米基因?qū)氩牧洗嬖谏a(chǎn)成本高、制備用原料不易得、難以普及推廣應用的缺點。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的之一在于針對現(xiàn)有技術的不足，提供一種功能化納米基因?qū)氩牧系闹苽浞椒ā?/p>

本發(fā)明的目的之二在于針對現(xiàn)有技術的不足，提供一種功能化納米基因?qū)氩牧稀?/p>

本發(fā)明的目的之三在于針對現(xiàn)有技術的不足，提供一種功能化納米基因?qū)氩牧系膽谩?/p>

為了實現(xiàn)上述目的之一，本發(fā)明采用如下技術方案：

一種功能化納米基因?qū)氩牧系闹苽浞椒ǎㄒ韵虏襟E：

步驟一，二氧化鉬顆粒的制備：將鉬、三氧化鉬和氯化銨進行水熱反應制得二氧化鉬顆粒；

步驟二，氨基硅烷修飾二氧化鉬：將步驟一制得的二氧化鉬顆粒與3-氨丙基三乙氧基硅烷在乙醇中進行回流反應一定時間，并離心水洗后，得到硅烷修飾物；

步驟三，包裹聚乙二醇：將預先制得的聚乙二醇-OTS和步驟二制得的硅烷修飾物加入到乙醇中，然后攪拌一定時間后，加入氫氧化銨，并進行離心水洗，得到固體物；

步驟四，葉酸修飾：將葉酸加入到磷酸緩沖液中，并加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺和N-羥基丁二酰亞胺，然后加入步驟三中得到的固體物，然后攪拌一定時間后，離心并用乙醇洗滌，然后再用水洗滌，得到納米MoO₂-PEG-FA基因?qū)氩牧稀?/p>

上述技術方案中，步驟一中，所述鉬、所述三氧化鉬和所述氯化銨的摩爾比為0.5~1：1~3：4~6。

上述技術方案中，步驟一中，所述水熱反應的溫度為150℃~170℃，所述水熱反應的時間為22小時~26小時；所述水熱反應的壓力為600KPa~700KPa。

上述技術方案中，步驟二中，所述二氧化鉬顆粒和所述3-氨丙基三乙氧基硅烷的摩爾比為0.5~2：4~10；所述乙醇的用量為，使所述二氧化鉬顆粒的質(zhì)量-體積濃度為0.8g/L~1.2g/L。

上述技術方案中，步驟二中，所述回流反應的溫度為70℃~90℃，所述回流反應的時間為2小時~4小時。

上述技術方案中，步驟三中，所述聚乙二醇-OTS的制備方法為：將4-甲苯磺酰氯分散于甲苯中，并加入三乙胺和聚乙二醇，然后在室溫下攪拌22小時~24小時，然后利用去氧水洗滌三乙胺后，進行減壓蒸餾除去甲苯，得到蒸餾物，并利用己烷洗滌蒸餾物后，繼續(xù)蒸餾得到聚乙二醇-OTS。

上述技術方案中，步驟三中，所述聚乙二醇-OTS、所述硅烷修飾物和所述氫氧化銨的質(zhì)量比為8~12：0.5~2：60~80；步驟三中乙醇的用量為，使所述硅烷修飾物的質(zhì)量-體積濃度為0.8g/L~1.2g/L；所述攪拌時間為10小時~14小時。

上述技術方案中，步驟四中，所述葉酸、所述1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺和所述N-羥基丁二酰亞胺的摩爾比為0.1~0.3：0.8~1.5：1~4；所述步驟四中的攪拌時間為10小時~14小時。

為了實現(xiàn)上述目的之二，本發(fā)明采用如下技術方案：

一種功能化納米基因?qū)氩牧希\用上述所述的一種功能化納米基因?qū)氩牧系闹苽浞椒ㄋ频玫募{米MoO2-PEG-FA基因?qū)氩牧希黾{米MoO2-PEG-FA基因?qū)氩牧蠟橐环N平均直徑為100nm左右的納米球形材料。

為了實現(xiàn)上述目的之三，本發(fā)明采用如下技術方案：

上述所述的一種功能化納米基因?qū)氩牧系闹苽浞椒ㄋ频玫募{米基因?qū)氩牧嫌糜谥谱骺鼓[瘤藥物的應用。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比較，有益效果在于：